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目的 拟构建激素敏感性脂肪酶(HSL)基因启动子报告质粒.方法 将以C57bL/6小鼠基因组DNA为模板扩增的小鼠HSL基因启动子序列,插入pGL4.10-basic荧光素酶报告质粒多克隆位点区域,再经PCR、限制性酶切和测序分析筛选出目标质粒pGL4.10-basic-HSL,采用荧光素酶活性分析评价质粒的转录活性.结果 启动子插入片段长度正确,序列与数据库一致;目标报告质粒转入293T细胞后,在过氧化物酶体增殖物激活受体γ作用下具有转录活性,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建HSL基因启动子报告质粒.

作者:李彦琦;左卓;高天畅;王贞缔;侯永永

来源:中国现代医学杂志 2020 年 30卷 7期

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作者:
李彦琦;左卓;高天畅;王贞缔;侯永永
来源:
中国现代医学杂志 2020 年 30卷 7期
标签:
激素敏感性脂肪酶 脂肪分解 启动子 荧光素酶 报告基因 构建
目的 拟构建激素敏感性脂肪酶(HSL)基因启动子报告质粒.方法 将以C57bL/6小鼠基因组DNA为模板扩增的小鼠HSL基因启动子序列,插入pGL4.10-basic荧光素酶报告质粒多克隆位点区域,再经PCR、限制性酶切和测序分析筛选出目标质粒pGL4.10-basic-HSL,采用荧光素酶活性分析评价质粒的转录活性.结果 启动子插入片段长度正确,序列与数据库一致;目标报告质粒转入293T细胞后,在过氧化物酶体增殖物激活受体γ作用下具有转录活性,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建HSL基因启动子报告质粒.