目的探讨复合重组人骨形成蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2, rhBMP-2)的壳聚糖-明胶支架的体外成骨作用. 方法将rhBMP-2与壳聚糖-明胶支架复合,按2×104/ml的密度接种成骨细胞系或成肌细胞系至rhBMP-2复合材料上,以及无rhBMP-2复合的对照材料上.A组(2T3成骨细胞接种组),其中实验A组:复合有rhBMP-2的材料14块,分别于接种培养第3、7、14和21天各取3块,以管家基因β-tubulin为内参照,RT-PCR行半定量分析,测定骨钙素基因表达水平,余2块于第14天终止培养,茜素红-S染色观察钙盐沉积情况;对照A组:未复合rhBMP-2的材料5块,接种培养至14 d终止,其中3块用于测定骨钙素基因表达,2块测定钙盐沉积.B组(C2C12成肌细胞接种组),实验组及对照组情况、培养时间及检测指标同A组.另取接种有rhBMP-2的材料2块接种2T3成骨细胞,培养3 d后扫描电镜观察细胞与材料的黏附情况. 结果 A组培养3 d,扫描电镜可见成骨细胞紧密黏附于多孔材料网表面,生长状态良好.实验A组成骨细胞中骨钙素基因的表达为1.28±0.17,对照A组14 d为0.56±0.09,表明复合rhBMP-2可促进材料中骨钙素基因表达,两者差异有统计学意义(P<0.01);rhBMP-2还可诱导不表达骨钙素基因的C2C12成肌细胞出现基因表达,B组培养21 d,实验B组为0.58±0.13,
作者:梁东春;左爱军;王宝利;张镜宇
来源:中国修复重建外科杂志 2005 年 19卷 9期