目的 探讨人转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)对传代羊髓核细胞的细胞外基质(extracellular matrix,ECM)和DNA合成调节因子的作用.方法 取1岁龄成年山羊腰椎间盘,体外分离培养羊髓核细胞,传至第3代后以携人TGF-β1(human TGF-β1,hTGF-β1)或lacZ基因的复制缺陷型腺病毒(Ad/hTGF-β1及Ad/lacZ)感染,分别为实验组和阴性对照组;未加病毒液的细胞为空白对照组;原代髓核细胞为原代组.然后继续单层或藻酸钙凝胶三维(3-D)培养10 d.对两种系统培养的细胞分别行DNA荧光定量、Western blot分析和蛋白多糖(glycosaminoglycan,GAG)定量检测.结果 DNA荧光定量显示,单层培养时实验组细胞的DNA合成显著高于两对照组(P<0.05),藻酸钙凝胶3-D培养各组间比较差异无统计学意义(P>0.05).Western blot检测hTGF-β1、Ⅱ型胶原、Ⅰ型胶原和Aggrecan的表达显示,两种培养系统中,实验组hTGF-β1、Ⅱ型胶原和Aggrecan的表达均显著高于两对照组(P<0.05),Ⅰ型胶原的表达显著低于两对照组(P<0.05),实验组Ⅱ型胶原/Ⅰ型胶原比值较两对照组显著增高(P<0.05).GAG定量结果显示,两种培养系统中实验组细胞的GAG合成均显著高于两对照组(P<0.05).结论 hTGF-β1在很大程度上可起到维持髓核细胞表型,并在细胞传代后
作者:李旭;侯筱魁;汤亭亭;李惠武;郭刚;裴国献
来源:中国修复重建外科杂志 2007 年 21卷 12期