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目的:β2肾上腺素能受体(ADRB2)基因是冠心病最重要的候选基因之一,本研究探讨微小核糖核酸(miRNA)对ADRB2基因的调控及其在冠心病中的意义.方法:根据"种子区"原理预测对ADRB2具有调节作用的miRNA,按种系恒定性以及与冠心病的关系程度进一步筛选.对候选miRNA在大鼠心肌细胞H9c2(2-1)中进行增强和抑制处理,验证候选miRNA对ADRB2基因的调控.增强处理为加入相应miRNA的前体分子以提高其功能水平,抑制处理采用经化学修饰的变异体作为竞争性拮抗剂以抑制其活性水平.增强和抑制实验分别以miRNA自身序列随机化所产生的阴性分子作对照.前体或抑制剂经转染导入细胞,48 h后对ADRB2蛋白进行免疫印迹杂交分析.结果:研究结果表明,let-7i是冠心病背景下对ADRB2最具调控意义的miRNA之一.ANOVA统计分析显示,以let-7i增强剂处理心肌细胞48 h后使ADRB2蛋白水平降低了61.83

作者:郭威早;李琳

来源:中国循环杂志 2013 年 28卷 1期

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作者:
郭威早;李琳
来源:
中国循环杂志 2013 年 28卷 1期
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β2肾上腺素能受体 微小核糖核酸 基因 冠心病
目的:β2肾上腺素能受体(ADRB2)基因是冠心病最重要的候选基因之一,本研究探讨微小核糖核酸(miRNA)对ADRB2基因的调控及其在冠心病中的意义.方法:根据"种子区"原理预测对ADRB2具有调节作用的miRNA,按种系恒定性以及与冠心病的关系程度进一步筛选.对候选miRNA在大鼠心肌细胞H9c2(2-1)中进行增强和抑制处理,验证候选miRNA对ADRB2基因的调控.增强处理为加入相应miRNA的前体分子以提高其功能水平,抑制处理采用经化学修饰的变异体作为竞争性拮抗剂以抑制其活性水平.增强和抑制实验分别以miRNA自身序列随机化所产生的阴性分子作对照.前体或抑制剂经转染导入细胞,48 h后对ADRB2蛋白进行免疫印迹杂交分析.结果:研究结果表明,let-7i是冠心病背景下对ADRB2最具调控意义的miRNA之一.ANOVA统计分析显示,以let-7i增强剂处理心肌细胞48 h后使ADRB2蛋白水平降低了61.83