目的:探讨心肌细胞中微小核糖核酸(miR)let-7c(miR-let-7c)对肌营养素基因表达是否具有调控作用以及可能的作用机制。<br> 方法:首先构建携带肌营养素基因3'非编码区(3'-UTR)片段的荧光素酶报告基因载体,与miR-let-7c前体共转染Hela细胞,双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶活性以验证miR-let-7c与肌营养素基因的靶向调控关系。进而培养大鼠心肌细胞H9c2,Taqman实时定量聚合酶链式反应(PCR)法检测miR转染效果,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测miR-let-7c及miR-let-7c抑制物转染心肌细胞后肌营养素蛋白表达,以及心肌肥厚相关信号通路分子核转录因子-κB(NF-κB)的活性变化。<br> 结果:荧光素酶活性实验结果表明,与重组荧光素酶报告基因表达载体(pMIR-MTPN)+ miR前体阴性对照组相比,pMIR-MTPN+ miR-let-7c前体组荧光素酶活性显著降低[(59.30±9.90)
作者:王玉瑶;王玉璇;翟翔;刘铭;解军
来源:中国循环杂志 2016 年 31卷 12期