目的:通过钙离子络合剂BAPTA-AM对抗过氧化氢诱导的神经母细胞瘤细胞氧化应激反应、探讨钙离子对 NLRP3炎症小体介导的细胞变性的影响作用。方法用过氧化氢处理SHSY5Y细胞以制作细胞氧化应激模型,然后用钙离子载体A23187或钙离子络合剂BAPTA-AM处理细胞模型;细胞实验分为4组:单纯过氧化氢处理组、过氧化氢加钙离子载体A23187处理组、过氧化氢加A23187再加BAPTA-AM处理组以及对照组;再分别用Western Blot 分别检测上述4组细胞NLRP3蛋白,用ELISA方法分别检测上述4组细胞的半胱天冬酶( Caspase-1)和IL-1β蛋白。结果单纯用过氧化氢处理后,细胞中NLRP3表达明显增加(P<0.05);加用A23187处理后,细胞蛋白NLRP3继续增加;Caspase-1和IL-1β表达也有显著增加,分别达到(57.1±19.2) pmol/L 和(484.2±49.5)pg/ml,与对照组比较[Caspase-1:(26.8±12.9)pmol/L;IL-1β:(326.9±52.1)pg/ml]差异有统计学意义(P<0.05, P<0.01)。再加用高效钙离子络合剂BAPTA-AM阻抑后,细胞蛋白NLRP3、Caspase-1和IL-1β均明显减少。结论钙超载很可能会强化过氧化氢诱导的细胞氧化应激、并产生由NLRP3炎症小体介导的细胞变性作用。
作者:柏华;赵学军;张启芳;余德军
来源:中华行为医学与脑科学杂志 2016 年 25卷 3期