目的 探讨复式PCR方法在疟疾诊断中的现场应用价值.方法 根据疟原虫18 S rRNA基因序列,合成疟原虫属特异性上游引物和间日疟原虫、恶性疟原虫种特异性下游引物,优化PCR反应体系,建立在同一PCR反应体系中同时检测间日疟原虫、恶性疟原虫基因组特异性DNA片段的疟疾诊断方法,并评价其现场应用价值.结果 间日疟原虫和恶性疟原虫基因组DNA经过复式PCR后,分别扩增出1 451 bp和833 bp的特异性条带,而伯氏疟原虫、食蟹猴疟原虫及健康人血样均无扩增带出现,用该反应体系可检出原虫血症为1.1×10-6和5.6× 10-7的间日疟原虫和恶性疟原虫感染.与镜检法相比,复式PCR检测119份现场样本,112份与镜检结果相同,阳性率为54％,漏诊率为0.8％,误诊率为0,而镜检法依次分别为53％、1.7％和3.4％.结论 复式PCR方法检测疟原虫具有简便、快速、特异、敏感等优点,在疑似病例的鉴别诊断和分子流行病学调查中具有良好的应用价值.
作者：顾亚萍；周华云；曾俊；朱国鼎；陶志勇；刘耀宝；朱韩武
来源：中国血吸虫病防治杂志 2012 年 24卷 3期
