目的 研究金刚烷胺对于SCA3神经元的保护作用及其机制.方法 该研究分为变异型ATXN3组、野生型ATXN3组及空白对照组.建立表达野生型ATXN3-Q14和变异型ATXN3-Q75基因片段的细胞模型,并对其进行鉴定和培养.在上述细胞模型中分别加入不同浓度的盐酸金刚烷胺溶液(1,5,10μg/mL)进行干预,空白对照组加等剂量的去离子水.药物干预48 h后,采用MTT法测定不同组别的细胞活力.采用AnnexinⅤ-FITC测定细胞凋亡,样品用流式细胞仪进行分析.采用Western Blot法检测不同浓度金刚烷胺对ATXN3变异表达的抑制作用.结果 (1)在变异型组中,用10μg/mL金刚烷胺干预时,从24 h起HEK293T细胞的增殖率显著高于空白对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);而5μg/mL及1μg/mL干预组与空白对照组相比,48 h内细胞增殖率无明显变化.(2)不同浓度的金刚烷胺均能不同程度地减少变异型组HEK293细胞的凋亡,且有剂量依赖性,组间比较差异有统计学意义(P<0.05).而不同浓度金刚烷胺干预野生型的细胞凋亡率和空白对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).(3)与空白对照组相比,金刚烷胺5μg/mL组和10μg/mL组的变异型ATXN3-Q75蛋白表达被明显抑制(P<0.05);而金刚烷胺1μg/mL组对变异型ATXN3-Q75蛋白表达仅轻度抑制(P>0.05);不同浓度的金刚烷胺对野生型
作者:欧阳嶷;张婧;阎雪晶;马楠;丁玉璋
来源:中国血液流变学杂志 2019 年 29卷 4期