目的 分离培养原代乳鼠心室肌细胞,观察其搏动性,并探索其静息电位(RP)、自发性动作电位(AP)等电生理特征.方法 用0.1％胰蛋白酶分离新生1 ～2 d SD大鼠心室肌细胞,并用差速贴壁法和5-溴脱氧尿嘧啶纯化心肌细胞；通过光镜观察心肌细胞形态和搏动情况；膜片钳技术记录心肌细胞的RP、自发性AP及钠离子电流(INa)特征.结果 光镜下见培养12 h后心肌细胞基本贴壁,培养至第5d时85％左右的心肌细胞都有自发性搏动,搏动频率80次/分左右；记录到自发性搏动心肌细胞RP为-85.34±4.15 mV,并可记录到同步产生的自发性AP,频率84±12次/分,而无自发搏动的心肌细胞RP为-42.1±6.5 mV,未能记录到自发性AP；心室肌细胞INa的阈电位为-60mV.结论 该方法分离培养的原代乳鼠心室肌细胞搏动比例高,同时证实了自发搏动性是乳鼠原代心肌细胞状态佳,并具有良好电生理特征的重要标志.
作者：童敏；杨向军；李红霞；韩莲花
来源：中国心脏起搏与心电生理杂志 2011 年 25卷 6期
