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目的 探讨基于光遗传学技术的程控光照终止大鼠室性心律失常的有效性及其影响因素.方法 将SD大鼠18只随机等分成3组:ChR2光照组,ChR2未光照组,空载病毒组,前两组动物经颈静脉注射100μl光敏蛋白载体病毒pAAV-CAG-hChR2(H134R)-mCherry,空载病毒组注射100μl空载病毒pAAV-CAG-mCherry.8周后,所有大鼠均麻醉后开胸充分暴露心脏,结扎冠状动脉左前降支后给予Burst电刺激(10 V,50 Hz,100个脉冲,持续2 s)诱发心室颤动或室性心动过速,ChR2光照组和空载病毒组分别给予4个间隔1 s的脉冲宽度为1 s的473 nm蓝光照射心外膜表面,ChR2未光照组不进行光照,观察光照终止的有效性,同时改变光功率密度(2、4、8、10、20倍阈值)观察不同光功率密度对终止效率的影响.对心脏组织石蜡切片进行HE染色和荧光观察.结果ChR2光照组的终止成功率为98.0% ±2.0%,明显高于ChR2未光照组(51.7% ±6.0%)和空载病毒光照组(57.2%±6.8%).功率密度依次增加(2、4、8、10以及20倍功率密度阈值),终止率也逐渐增加,分别为64.0% ±6.8% 、70.0% ±7.1% 、74.0% ±8.7% 、88.0% ±3.7% 和98.0% ±2.0%.HE染色显示急性心肌梗死存在,石蜡切片红色荧光显示ChR2光照组 、ChR2未光照组转染目标光敏感蛋白ChR2成功.而空载病毒组未表达ChR2.

作者:程玥;李剑怡;饶盼盼;刘华芬;王晞

来源:中国心脏起搏与心电生理杂志 2020 年 34卷 4期

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作者:
程玥;李剑怡;饶盼盼;刘华芬;王晞
来源:
中国心脏起搏与心电生理杂志 2020 年 34卷 4期
标签:
光遗传学 心室颤动 室性心动过速 光敏蛋白 腺相关病毒
目的 探讨基于光遗传学技术的程控光照终止大鼠室性心律失常的有效性及其影响因素.方法 将SD大鼠18只随机等分成3组:ChR2光照组,ChR2未光照组,空载病毒组,前两组动物经颈静脉注射100μl光敏蛋白载体病毒pAAV-CAG-hChR2(H134R)-mCherry,空载病毒组注射100μl空载病毒pAAV-CAG-mCherry.8周后,所有大鼠均麻醉后开胸充分暴露心脏,结扎冠状动脉左前降支后给予Burst电刺激(10 V,50 Hz,100个脉冲,持续2 s)诱发心室颤动或室性心动过速,ChR2光照组和空载病毒组分别给予4个间隔1 s的脉冲宽度为1 s的473 nm蓝光照射心外膜表面,ChR2未光照组不进行光照,观察光照终止的有效性,同时改变光功率密度(2、4、8、10、20倍阈值)观察不同光功率密度对终止效率的影响.对心脏组织石蜡切片进行HE染色和荧光观察.结果ChR2光照组的终止成功率为98.0% ±2.0%,明显高于ChR2未光照组(51.7% ±6.0%)和空载病毒光照组(57.2%±6.8%).功率密度依次增加(2、4、8、10以及20倍功率密度阈值),终止率也逐渐增加,分别为64.0% ±6.8% 、70.0% ±7.1% 、74.0% ±8.7% 、88.0% ±3.7% 和98.0% ±2.0%.HE染色显示急性心肌梗死存在,石蜡切片红色荧光显示ChR2光照组 、ChR2未光照组转染目标光敏感蛋白ChR2成功.而空载病毒组未表达ChR2.