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目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)-蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶(AKt)-内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号转导通路在硫化氢(H2S)抑制内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱导心肌肥大过程中的作用。方法体外培养原代心肌细胞,将其随机分为6组,每组4孔,①对照组:加入等体积无血清的DMEM培养基;②肥大(ET-1)组:加入终浓度为10-8 mol/L的ET-1;剩余4组为实验组,各组分别加入不同终浓度的H2S供体-NaHS:③10-15 M NaHS组:加入10-15 mol/L NaHS+10-8 mol/l ET-1;④10-14 M NaHS组:加入10-14 mol/L NaHS+10-8 mol/L ET-1;⑤10-13 M NaHS组:加入10-13 mol/L NaHS+10-8 mol/L ET-1;⑥10-12 M NaHS组:加入10-12 mol/L NaHS+10-8 mol/L ET-1。上述各组药物分别刺激24 h后测定心肌细胞表面积、细胞总蛋白含量、培养液NO含量,RT-PCR检测心肌细胞心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKt)、eNOS mRNA水平,Western Blot技术检测总AKt和磷酸化AKt蛋白表达含量。结果肥大(ET-1)组的心肌细胞表面积(1933.80±143.06)和细胞总蛋白含量(367.51±2

作者:王雅婧;张学志;刁力;王其新

来源:中国循证心血管医学杂志 2014 年 5期

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作者:
王雅婧;张学志;刁力;王其新
来源:
中国循证心血管医学杂志 2014 年 5期
标签:
H2S 蛋白激酶B 内皮型一氧化氮合酶 ET-1 心肌肥大 Hydrogen sulfide Protein kinase B Endothelial nitric oxide synthase Endothelin-1 Myocardial hypertrophy
目的:观察磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)-蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶(AKt)-内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号转导通路在硫化氢(H2S)抑制内皮素-1(endothelin-1,ET-1)诱导心肌肥大过程中的作用。方法体外培养原代心肌细胞,将其随机分为6组,每组4孔,①对照组:加入等体积无血清的DMEM培养基;②肥大(ET-1)组:加入终浓度为10-8 mol/L的ET-1;剩余4组为实验组,各组分别加入不同终浓度的H2S供体-NaHS:③10-15 M NaHS组:加入10-15 mol/L NaHS+10-8 mol/l ET-1;④10-14 M NaHS组:加入10-14 mol/L NaHS+10-8 mol/L ET-1;⑤10-13 M NaHS组:加入10-13 mol/L NaHS+10-8 mol/L ET-1;⑥10-12 M NaHS组:加入10-12 mol/L NaHS+10-8 mol/L ET-1。上述各组药物分别刺激24 h后测定心肌细胞表面积、细胞总蛋白含量、培养液NO含量,RT-PCR检测心肌细胞心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,PKB/AKt)、eNOS mRNA水平,Western Blot技术检测总AKt和磷酸化AKt蛋白表达含量。结果肥大(ET-1)组的心肌细胞表面积(1933.80±143.06)和细胞总蛋白含量(367.51±2