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目的:研究瓜蒌皮提取物对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞的保护作用及其机制.方法:以采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)为化学缺氧剂,建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,筛选不同浓度Na2S2O4(0.625~10 mmol/L)和不同缺氧时间(10~60 min)、复氧时间(2~8 h)的造模条件,以及瓜蒌皮提取物给药浓度(12.5~400μg/mL).将细胞分为正常组、模型组、瓜蒌皮提取物不同剂量组(即TPE低、中、高剂量组,25、50、100μg/mL)和阳性对照组(槲皮素,25μmol/L),加入相应药物进行预处理24 h后,再建立缺氧/复氧损伤模型.采用MTT法检测各组细胞存活率;采用酶联免疫吸附法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用流式细胞术观察细胞凋亡情况;采用Western blotting法检测细胞中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平.结果:心肌细胞缺氧/复氧损伤造模条件为Na2S2O4造模浓度2.5 mmol/L,缺氧时间30 min,复氧时间4 h;12.5~400μg/mL的瓜蒌皮提取物对细胞均无毒性.分组处理后结果显示,与空白组比较,模型组细胞存活率显著降低、凋亡率显著升高,细胞中CK-MB、LDH、MDA水平均显著升高,SOD水平显著降低,Bax的蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高,Bcl-2的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)

作者:楚冬海;张振秋

来源:中国药房 2019 年 30卷 8期

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作者:
楚冬海;张振秋
来源:
中国药房 2019 年 30卷 8期
标签:
瓜蒌皮 连二亚硫酸钠 缺氧/复氧损伤 心肌细胞 机制
目的:研究瓜蒌皮提取物对缺氧/复氧损伤H9c2心肌细胞的保护作用及其机制.方法:以采用连二亚硫酸钠(Na2S2O4)为化学缺氧剂,建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤模型,筛选不同浓度Na2S2O4(0.625~10 mmol/L)和不同缺氧时间(10~60 min)、复氧时间(2~8 h)的造模条件,以及瓜蒌皮提取物给药浓度(12.5~400μg/mL).将细胞分为正常组、模型组、瓜蒌皮提取物不同剂量组(即TPE低、中、高剂量组,25、50、100μg/mL)和阳性对照组(槲皮素,25μmol/L),加入相应药物进行预处理24 h后,再建立缺氧/复氧损伤模型.采用MTT法检测各组细胞存活率;采用酶联免疫吸附法检测细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;采用流式细胞术观察细胞凋亡情况;采用Western blotting法检测细胞中Bax、Bcl-2的蛋白表达水平.结果:心肌细胞缺氧/复氧损伤造模条件为Na2S2O4造模浓度2.5 mmol/L,缺氧时间30 min,复氧时间4 h;12.5~400μg/mL的瓜蒌皮提取物对细胞均无毒性.分组处理后结果显示,与空白组比较,模型组细胞存活率显著降低、凋亡率显著升高,细胞中CK-MB、LDH、MDA水平均显著升高,SOD水平显著降低,Bax的蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高,Bcl-2的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01)