目的:探索龙鳖胶囊含药血清(后文简写为"LBJN")对Yes结构结合蛋白(YAP)抑制剂维替泊芬(verteporfin)诱导软骨细胞凋亡的保护作用及机制.方法:通过两步酶消化法提取原代人膝骨性关节炎软骨细胞,利用甲苯胺蓝染色法和Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光染色法对细胞进行鉴定.采用流式细胞术检测2、5μmol/L verteporfin单用和分别与5％LBJN联用48 h后对细胞凋亡的影响,并设置溶剂对照[0.1％二甲基亚砜(DMSO)]和5％LBJN对照.采用Western blot法检测0.1％DMSO(溶剂对照)、2μmol/L verteporfin、2μmol/L verteporfin+5％LBJN和0(空白对照)、2.5％LBJN、5％LBJN处理48 h后细胞中凋亡相关蛋白[YAP、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、活化胱天蛋白酶3(cleaved-caspase-3)]的表达水平;采用Western blot法检测0(空白对照)、2.5％、5％LBJN处理48 h后细胞中自噬相关蛋白[哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、Beclin-1、LC3A/B]的表达水平.结果:分离出的细胞符合软骨细胞的特征.与0.1％DMSO比较,2、5μmol/L verteporfin作用后细胞的凋亡率均显著升高(P<0.05),且两个浓度的作用效果相当(P>0.05);与单用verteporfin比较,2、5μmol/L verteporfin与5％LBJN联用后细胞的凋亡率均显著降低(P<0.05).与0.1％DMSO比较,2μmol/L verteporfin作用后细胞中Y

作者：梁桂洪；黄和涛；潘建科；曾令烽；杨伟毅；罗明辉；杨园；陈红云；韩燕鸿；赵金龙；刘军

来源：中国药房 2021 年 32卷 12期