目的 优化桦褐孔菌总三萜提取物的纯化工艺,考察其纯化物的抗肿瘤活性.方法 以桦褐孔菌醇为对照品,建立桦褐孔菌总三萜的含量测定方法.采用单因素实验筛选大孔吸附树脂种类、上样体积、上样液质量浓度、上样流速、洗脱剂体积分数、洗脱剂用量、洗脱流速,确定并验证该粗提物的纯化工艺.通过细胞增殖实验、迁移实验、流式细胞术和AO/EB试剂盒检测桦褐孔菌总三萜纯化物对人宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移及凋亡的影响.结果 桦褐孔菌总三萜粗提物的最佳纯化工艺为:AB-8型大孔吸附树脂,上样液质量浓度为2.0 mg/mL,上样体积为140 mL,上样流速为1.0 mL/min;洗脱时先用50%的乙醇40 mL除杂,再用95%的乙醇160 mL洗脱,洗脱流速为3.0 mL/min.纯化后桦褐孔菌总三萜的质量分数从34.36%升至73.39%.桦褐孔菌总三萜纯化物可抑制HeLa细胞增殖,半数抑制浓度为184.20μg/mL;与对照组相比,该纯化物可显著抑制HeLa细胞的迁移,促进其凋亡(P<0.05或P<0.01).结论 成功优化了桦褐孔菌总三萜提取物的纯化工艺,该纯化物可抑制HeLa细胞增殖和迁移,诱导其凋亡.
作者:邵骏菁;杨颖;马大龙;吕志强;田景振;张晓平
来源:中国药房 2022 年 33卷 18期