目的:探讨玻片蛋白质芯片的构建方法及其中间操作条件的选择与优化.方法:利用生物芯片点样仪将超微量蛋白质点到经特殊处理的玻璃片表面,然后选用不同的化学试剂对玻片背景进行封闭;再用荧光素标记的蛋白质与点样蛋白杂交;最后用生物芯片分析仪扫描成像并进行分析,比较不同条件下芯片的显示效果.结果:蛋白质样品与片基稳定结合,并保持原活性状态;封闭试剂选用酪蛋白或明胶效果较佳;点样探针与其特异蛋白质抗体可稳定结合,结合效果与点样蛋白浓度在一定范围内呈正相关;在1.6 cm×1.6 cm的玻璃片面积上,构建了36×36=1269点的蛋白质芯片.结论:本实验条件下,蛋白质抗原或抗体可以稳定地固定于经过处理的玻璃片表面,制成免疫型蛋白芯片,并可通过随后的抗原抗体反应与荧光素标记的相应抗体或抗原结合,用生物芯片分析仪可对其荧光信号进行检测分析.
作者：侯伟健；潘忠诚；何群；杨宏伟；王绍成；马佳明；赵雨杰
来源：中国医科大学学报 2003 年 32卷 2期
