目的:探讨大鼠骨髓间充质干细胞(mMSCs)在体外定向诱导分化为肝细胞及其方法.方法:采用梯度离心法分离纯化雄性SD大鼠的mMSCs.A组原代培养;B组原代培养分别加刺激因子50 ng/ml肝细胞生长因子(HGF)和50 ng/ml成纤维细胞生长因子4(FGF-4),倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化.于培养的7、14、21、28 d,细胞免疫荧光法检测各组细胞甲胎蛋白(AFP) 、白蛋白(ALB)、细胞角蛋白18(CK-18) 、细胞角蛋白19(CK-19)的表达.采用过碘酸希夫(PAS)染色法检测各组细胞糖原染色情况.结果:分离纯化B组大鼠的mMSCs,应用HGF和FGF-4诱导10 d后变为肝细胞样圆形.细胞免疫荧光测定B组显示,培养第7 d AFP即出现阳性,第21 d表达明显减弱;第7 d CK-19染色阳性,以后增强;第14 d白蛋白与CK-18染色开始阳性,以后表达逐渐加强.A组在培养过程中不表达AFP、ALB、CK-18和CK-19.糖原染色显示,B组第14 d开始阳性,一直持续到第28 d;A组未见阳性染色.结论:大鼠mMSCs在较高浓度的HGF及FGF-4诱导下可分化为肝细胞.
作者:鲁学恒;马力;刘沛
来源:中国医科大学学报 2007 年 36卷 3期