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目的 通过定点突变,构建α干扰素-2bHis58(IFNα-2bHis58)),以期获得高效的新型药物分子.方法 采用PCR体外定点突变技术,使α干扰素-2b基因的第58位密码子由GAA突变为CAC.将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).表达的IFNα-2bHis58经包涵体变复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定.结果 IFNα-2bHis58主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30

作者:王秀;刘金毅;牛晓霞;杨轶;金颖;彭秀娟;王艳

来源:中国医科大学学报 2008 年 37卷 5期

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作者:
王秀;刘金毅;牛晓霞;杨轶;金颖;彭秀娟;王艳
来源:
中国医科大学学报 2008 年 37卷 5期
标签:
α干扰素-2b 定点突变 蛋白表达 蛋白纯化 高效
目的 通过定点突变,构建α干扰素-2bHis58(IFNα-2bHis58)),以期获得高效的新型药物分子.方法 采用PCR体外定点突变技术,使α干扰素-2b基因的第58位密码子由GAA突变为CAC.将扩增片段克隆入pET23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3).表达的IFNα-2bHis58经包涵体变复性、DEAE层析和CM层析纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定.结果 IFNα-2bHis58主要以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30