目的 探讨HBV x基因(HBx)对人肾小管上皮细胞株(HK-2)增殖和凋亡的影响及机制.方法 采用脂质体转染法,将质粒pCDNA3.1 (+)HBx转染至HK-2细胞株.细胞实验分5组,对照组、转染空质粒pCDNA3.1(+)组、转染pCDNA3.1 (+)HBx24 h组、转染pCDNA3.1 (+)HBx 48 h组、转染pCDNA3.1(+)HBx 72 h组.CCK8方法检测HBx对各组细胞增殖抑制率的影响;用透射电镜及AV/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率.应用免疫细胞化学及免疫印迹检测各组细胞凋亡相关蛋白Bax及Bcl-2水平.结果 经酶切鉴定及测序结果显示pCDNA3.1-HBx构建成功.与对照组相比,空质粒组细胞存活率及凋亡率无明显差异,凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值无明显差异(P>0.05).转染HBx基因24 h后,细胞增殖明显受抑,凋亡率显著增加,Bax/Bcl-2比值开始增高.至72 h,细胞增殖抑制率最高达到(35.27±1.10)%,细胞凋亡率达到最高为(23.80±2.16)%,Bax/Bcl-2比值显著增高.与对照组及其他各组比较,具有显著性差异(P<0.05).结论 HBx基因可抑制HK-2细胞增殖并通过提高凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比值诱导其凋亡.
作者:何平;李红;李德天;冯国和
来源:中国医科大学学报 2014 年 43卷 1期