目的 研究血中可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的损伤并探讨其发生机制.方法 应用不同浓度人重组CD40L(r-CD40L)刺激HUVEC 24 h,建立单核细胞(THP-1)渗出模型,评价内皮细胞通透性.应用不同浓度r-CD40L刺激HUVEC24h,逆转录PCR技术检测HUVEC中TNF-α mRNA水平,观察不同浓度r-CD40L对内皮细胞功能的影响(以TNF-α mRNA水平表示).采用ELISA法测定不同浓度r-CD40L刺激HUVEC后上清液中TNF-α蛋白水平.应用25μg/L r-CD40L刺激HUVEC不同时间,流式细胞技术检测HUVEC凋亡情况.结果 随着r-CD40L刺激浓度的增加,单核细胞透膜数逐渐升高,HUVEC中TNF-α mRNA表达水平逐渐升高,HUVEC上清液中TNF-α的浓度逐渐增加.应用25 μg/L r-CD40L刺激HUVEC不同时间,未诱导出细胞凋亡.结论 sCD40L对脐静脉内皮细胞通透性的影响呈浓度依赖性,其机制可能是通过上调内皮细胞核内TNF-α mRNA表达并促进其分泌TNF-α实现的.sCD40L对HUVEC功能的影响明显早于细胞的凋亡.
作者:史丽;尹洁;马静;王娟;姜秉芬
来源:中国医科大学学报 2014 年 43卷 8期