目的：探讨二硫苏糖醇（DTT）有助于PreScission蛋白酶切除重组蛋白GST?CT3标签GST的方法。方法在大肠埃希菌BL21中转化入pGEX?6P?3/CT3重组质粒并诱导其表达，用B?PER提取纯化重组蛋白GST?CT3，在10 mmol/L DTT存在的情况下PreScission蛋白酶切除GST标签得到高浓度的CT3蛋白，进行SDS?PAGE电泳鉴定CT3蛋白。结果不含DTT情况下， PreScission蛋白酶很难切除重组蛋白GST?CT3的标签蛋白GST，而在10 mmol/L DTT存在的情况下，PreScission蛋白酶能够切除重组蛋白GST?CT3的标签蛋白GST，得到高浓度的CT3蛋白。结论10 mmol/L DTT有助于PreScission蛋白酶切除重组蛋白GST?CT3的标签蛋白GST，得到高浓度的CT3蛋白。
作者：孙宇；封瑞；杨磊；毛楠；胡慧媛；孙雪菲；郝丽英
来源：中国医科大学学报 2015 年 7期
