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目的 观察乌司他丁对人肺微血管内皮细胞(HPMECs)屏障功能的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 将HP-MECs分为对照组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、TNF-α+乌司他丁(10、100和1000 U/mL乌司他丁)组和TNF-α+N-乙酰半胱氨酸(NAC)组.通过免疫荧光方法和硝酸还原酶法检测各组内皮细胞产生活性氧(ROS)及一氧化氮(NO)的情况,通过电阻抗法和荧光分光光度计分别检测Transwell小室内单层细胞电阻值和透过单层细胞的FITC-dextran来评价内皮细胞的通透性,通过West-ern blotting和免疫荧光方法检测血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达情况.结果 与对照组相比,TNF-α组HPMECs产生大量的ROS和NO,而TNF-α+100 U/mL乌司他丁组和TNF-α+1000 U/mL乌司他丁组内皮细胞产生的ROS和NO较TNF-α组明显减少(P<0.05),这与TNF-α+NAC组结果相似.TNF-α组单层内皮细胞的电阻值较对照组明显降低,透过单层细胞的FITC-dextran明显增加,内皮细胞的VE-cadherin表达量也明显减少.TNF-α+100 U/mL乌司他丁组和TNF-α+NAC组与TNF-α组比较,单层内皮细胞的电阻值明显升高,透过单层细胞的FITC-dextran明显减少,内皮细胞的VE-cadherin表达量也明显增加(P<0.05).结论 乌司他丁可通过抑制TNF-α诱导产生的氧化应激损伤来增加HPMECs中VE-cadhe

作者:穆盛田;唐洁;阎东莉;郑振

来源:中国医科大学学报 2020 年 49卷 1期

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作者:
穆盛田;唐洁;阎东莉;郑振
来源:
中国医科大学学报 2020 年 49卷 1期
标签:
急性呼吸窘迫综合征 内皮细胞 血管内皮钙黏蛋白 乌司他丁 氧化应激
目的 观察乌司他丁对人肺微血管内皮细胞(HPMECs)屏障功能的保护作用,并初步探讨其作用机制.方法 将HP-MECs分为对照组、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)组、TNF-α+乌司他丁(10、100和1000 U/mL乌司他丁)组和TNF-α+N-乙酰半胱氨酸(NAC)组.通过免疫荧光方法和硝酸还原酶法检测各组内皮细胞产生活性氧(ROS)及一氧化氮(NO)的情况,通过电阻抗法和荧光分光光度计分别检测Transwell小室内单层细胞电阻值和透过单层细胞的FITC-dextran来评价内皮细胞的通透性,通过West-ern blotting和免疫荧光方法检测血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)的表达情况.结果 与对照组相比,TNF-α组HPMECs产生大量的ROS和NO,而TNF-α+100 U/mL乌司他丁组和TNF-α+1000 U/mL乌司他丁组内皮细胞产生的ROS和NO较TNF-α组明显减少(P<0.05),这与TNF-α+NAC组结果相似.TNF-α组单层内皮细胞的电阻值较对照组明显降低,透过单层细胞的FITC-dextran明显增加,内皮细胞的VE-cadherin表达量也明显减少.TNF-α+100 U/mL乌司他丁组和TNF-α+NAC组与TNF-α组比较,单层内皮细胞的电阻值明显升高,透过单层细胞的FITC-dextran明显减少,内皮细胞的VE-cadherin表达量也明显增加(P<0.05).结论 乌司他丁可通过抑制TNF-α诱导产生的氧化应激损伤来增加HPMECs中VE-cadhe