目的 探讨长链非编码RNA—MEG8对阿尔茨海默病(AD)微环境下血脑屏障通透性的影响及作用机制.方法 应用β淀粉样蛋白(Aβ)处理人脑微血管内皮细胞hCMEC/D3(AD-ECs),模拟体外AD微环境下血脑屏障.实时荧光定量PCR检测正常人脑微血管内皮细胞(ECs)和AD-ECs中MEG8的表达.稳定转染沉默MEG8质粒后,应用微孔电阻系统检测跨内皮阻抗(TEER),TMB显色法测量辣根过氧化物酶(HRP)渗出量.免疫荧光法比较对照组、转染MEG8阴性对照组(sh-NC组)、转染MEG8沉默质粒组(sh-MEG8组)紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin的分布变化,Western blotting检测ZO-1和occludin的表达.结果 MEG8在AD-ECs中的表达显著高于ECs(P<0.01).与sh-NC组比较,sh-MEG8组TEER值显著升高,HRP渗出量显著降低(均P<0.01).紧密连接相关蛋白ZO-1和occludin在AD-ECs边界呈现相对连续的分布.与sh-NC组比较,sh-MEG8组紧密连接相关蛋白ZO-1和occlu-din的表达显著增加(均P<0.01).结论 MEG8在AD-ECs中表达上调,沉默MEG8表达显著降低AD微环境下血脑屏障的通透性,其作用机制可能是通过改变ZO-1和occludin的细胞分布,增加ZO-1和occludin的蛋白表达实现的.
作者：黄鑫；朱璐；林梅青；王继蕊；商秀丽
来源：中国医科大学学报 2022 年 51卷 12期
