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目的观察不同浓度的膦甲酸钠(PFA)对高磷诱导的牛主动脉血管平滑肌细胞钙沉积和骨钙素(OC)表达的影响.方法用不同磷浓度(正常磷Pi 1.5 mmol*L-1、高磷Pi 2.0 mmol*L-1)及含不同浓度膦甲酸钠的培养液,体外培养牛主动脉平滑肌细胞,观察血管平滑肌细胞钙沉积及骨钙素表达.用甲ο-酚酞络合酮方法测定钙含量,BCA法测定蛋白含量.培养上清液中骨钙素浓度用放射免疫法测定,用蛋白含量标化钙含量、骨钙素的浓度,RT-PCR观察骨钙素mRNA 的表达.结果①高磷组较正常磷组平滑肌细胞钙沉积增加:细胞培养6 d后,高磷组(77.187±11.692) mg*g-1 Pro, 正常磷组(25.768±1.750) mg*g-1 Pro,P<0.01;②膦甲酸钠能有效地抑制钙沉积:培养6 d,高磷+PFA 1.0 mmol*L-1组(37.729±5.899) mg*g-1 Pro,与高磷未干预组相比,P<0.01;③高磷组骨钙素表达明显增高.高磷组与正常磷组相比,培养上清液中骨钙素水平:(1.503×10-2±2.601×10-3) mg*g-1 Pro对(2.981×10-3±8.382×10-4) mg*g-1 Pro,P<0.01;平滑肌细胞骨钙素mRNA表达(OC/GAPDH):1.886±0.165对0.752±0.052 1,P<0.01;④膦甲酸钠能有效地抑制骨钙素的表达.高磷+PFA 1.0 mmol*L-1组与高磷组比,培养上清液中:(4.529×10-3±1.250×10-3) mg*g-1 Pro对(1.503×10-2±2.601×10-3) mg*g

作者:陆卫平;王笑云;赵秀芬

来源:中国药理学通报 2003 年 19卷 3期

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作者:
陆卫平;王笑云;赵秀芬
来源:
中国药理学通报 2003 年 19卷 3期
标签:
平滑肌细胞 无机磷酸盐 钙化 骨钙素 膦甲酸钠
目的观察不同浓度的膦甲酸钠(PFA)对高磷诱导的牛主动脉血管平滑肌细胞钙沉积和骨钙素(OC)表达的影响.方法用不同磷浓度(正常磷Pi 1.5 mmol*L-1、高磷Pi 2.0 mmol*L-1)及含不同浓度膦甲酸钠的培养液,体外培养牛主动脉平滑肌细胞,观察血管平滑肌细胞钙沉积及骨钙素表达.用甲ο-酚酞络合酮方法测定钙含量,BCA法测定蛋白含量.培养上清液中骨钙素浓度用放射免疫法测定,用蛋白含量标化钙含量、骨钙素的浓度,RT-PCR观察骨钙素mRNA 的表达.结果①高磷组较正常磷组平滑肌细胞钙沉积增加:细胞培养6 d后,高磷组(77.187±11.692) mg*g-1 Pro, 正常磷组(25.768±1.750) mg*g-1 Pro,P<0.01;②膦甲酸钠能有效地抑制钙沉积:培养6 d,高磷+PFA 1.0 mmol*L-1组(37.729±5.899) mg*g-1 Pro,与高磷未干预组相比,P<0.01;③高磷组骨钙素表达明显增高.高磷组与正常磷组相比,培养上清液中骨钙素水平:(1.503×10-2±2.601×10-3) mg*g-1 Pro对(2.981×10-3±8.382×10-4) mg*g-1 Pro,P<0.01;平滑肌细胞骨钙素mRNA表达(OC/GAPDH):1.886±0.165对0.752±0.052 1,P<0.01;④膦甲酸钠能有效地抑制骨钙素的表达.高磷+PFA 1.0 mmol*L-1组与高磷组比,培养上清液中:(4.529×10-3±1.250×10-3) mg*g-1 Pro对(1.503×10-2±2.601×10-3) mg*g