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目的自制大鼠尾腱Ⅰ型胶原培养原代大鼠肝细胞,测定肝细胞中细胞色素P450(cytochrome P450, CYP)酶活性.方法制备无菌大鼠尾腱Ⅰ型胶原,比较单层胶原铺底法(collagen coated, CC)及胶原夹心法(collagen sandwich system, CSS)培养大鼠肝细胞的生长及功能维持情况.CSS法培养肝细胞,分别加入泼尼松龙(100 μmol·L-1,3 d)、尼莫地平(50 μmol·L-1,2 d)和利福平(50 μmol·L-1,2 d),测定CYP1A、CYP2E1及CYP3A酶活性.结果 CSS法培养6 d后,肝细胞生长良好.CC法培养3 d后细胞开始脱落,此后持续增多;6 d后,培养上清液中ALT、AST与LDH活性升高,均高于同期CSS法培养细胞上清液中的水平.加入经CYP3A代谢药物,CSS培养肝细胞CYP1A活性无明显改变;尼莫地平使CYP3A活性升高33

作者:夏雪雁;彭仁琇;王君

来源:中国药理学通报 2004 年 20卷 3期

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夏雪雁;彭仁琇;王君
来源:
中国药理学通报 2004 年 20卷 3期
标签:
Ⅰ型胶原 胶原夹心培养法 肝细胞 细胞色素P450 泼尼松龙 尼莫地平 利福平
目的自制大鼠尾腱Ⅰ型胶原培养原代大鼠肝细胞,测定肝细胞中细胞色素P450(cytochrome P450, CYP)酶活性.方法制备无菌大鼠尾腱Ⅰ型胶原,比较单层胶原铺底法(collagen coated, CC)及胶原夹心法(collagen sandwich system, CSS)培养大鼠肝细胞的生长及功能维持情况.CSS法培养肝细胞,分别加入泼尼松龙(100 μmol·L-1,3 d)、尼莫地平(50 μmol·L-1,2 d)和利福平(50 μmol·L-1,2 d),测定CYP1A、CYP2E1及CYP3A酶活性.结果 CSS法培养6 d后,肝细胞生长良好.CC法培养3 d后细胞开始脱落,此后持续增多;6 d后,培养上清液中ALT、AST与LDH活性升高,均高于同期CSS法培养细胞上清液中的水平.加入经CYP3A代谢药物,CSS培养肝细胞CYP1A活性无明显改变;尼莫地平使CYP3A活性升高33