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目的 利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础.方法 以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选,挑取单克隆ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性.结果 经ELISA初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中,其中6号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为Phage ZS 6.细胞免疫荧光试验进一步证明,合成的相应多肽FITCZS 6对NCI-H1299具有高亲和力.结论 利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZS 6,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础.

作者:石磊;潘雪刁;王军业;潘琴;巫玮;金桂芳;房思练;侯炳忠;何兴祥;臧林泉

来源:中国药理学通报 2009 年 25卷 3期

知识库介绍

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作者:
石磊;潘雪刁;王军业;潘琴;巫玮;金桂芳;房思练;侯炳忠;何兴祥;臧林泉
来源:
中国药理学通报 2009 年 25卷 3期
标签:
噬菌体肽库 多肽 肺癌 NCI-H1299 减性筛选
目的 利用噬菌体展示肽库筛选出与肺癌NCI-H1299细胞特异性结合的多肽,鉴定其特异性和亲和力,为寻找肺癌早期诊断和治疗标志物打下基础.方法 以肺癌细胞NCI-H1299为靶细胞,肺二倍体成纤维细胞MRC-5为吸附细胞,在37℃下对噬菌体随机十二肽库进行三轮减性筛选,挑取单克隆ELISA初步鉴定噬菌体克隆亲和力;阳性克隆提取质粒,测序后合成多肽,鉴定多肽的亲和力及特异性.结果 经ELISA初步鉴定,随机挑选的20个单克隆中,其中6号对NCI-H1299亲和力最高,将其命名为Phage ZS 6.细胞免疫荧光试验进一步证明,合成的相应多肽FITCZS 6对NCI-H1299具有高亲和力.结论 利用噬菌体随机十二肽成功筛选出与肺癌细胞具有较高亲和力的多肽ZS 6,为肺癌的早期诊断和靶向治疗奠定基础.