目的 用比较蛋白质组学策略筛选蜕皮甾酮干预胰岛素抵抗HepG_2细胞前后的差异表达蛋白,为寻找胰岛素增敏药物作用靶点提供新的实验依据.方法 将HepG_2细胞置于5×10~(-7) mol·L~(-1)胰岛素培养液中诱导16 h,观察高胰岛素对HepG_2细胞葡萄糖消耗量的影响,确定模型建立后,加入含蜕皮甾酮10~(-5) mol·L~(-1)培养液继续孵育24 h,继续观察蜕皮甾酮对胰岛素抵抗模型细胞葡萄糖消耗量的影响;并用裂解液提取干预前后细胞的蛋白质,以双向电泳技术对干预前后差异表达蛋白进行筛选,差异表达蛋白再经MALDI-TOF-MS质谱分析,MS-Fit数据库鉴定.结果 与模型组比较,蜕皮甾酮干预组找到53个差异蛋白点,其中35个蛋白点表达上调,18个蛋白点表达下调,鉴定了其中6个蛋白.结论 蜕皮甾酮胰岛素增敏作用靶点涉及多种与胰岛素抵抗相关的蛋白质和激酶,为后续靶蛋白的筛选及其功能研究奠定了基础.
作者:宋敏;李耀军;赖国旗;邱宗荫
来源:中国药理学通报 2009 年 25卷 12期