目的:研究雷帕霉素( rapamycin,RAPA)在体外对上皮鳞癌细胞系A431的增殖、迁移以及侵袭能力的影响。方法体外培养人上皮鳞癌细胞A431,通过噻唑蓝( MTT)实验检测不同浓度的RAPA (5、10、20 nmol · L-1)对A431增殖的影响,并筛选出最适浓度。依此浓度分别通过划痕、Tr-answell试验检测 A431的迁移和侵袭能力变化。经 RAPA处理后,采用逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR )和 Western blot检测A431中骨桥蛋白( osteopontin,OPN)的mRNA和蛋白的表达水平的变化。结果 MTT实验结果显示不同浓度RAPA对A431增殖有抑制作用,且表现浓度依赖性。 RAPA作用于A431细胞48 h后,划痕实验及 Transwell实验显示A431的迁移和侵袭能力受到明显抑制。 RT-PCR和Western blot结果都显示RAPA处理的 A431细胞中 OPN的表达下调。结论 RAPA可降低鳞癌细胞A431的增殖、迁移以及侵袭能力,其机制可能与RAPA抑制OPN的表达有关。
作者:郭思佳;查晓军;周海胜
来源:中国药理学通报 2014 年 4期