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目的:探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)对人高转移性肝癌 HCCLM3细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。方法构建Cx26干扰慢病毒载体感染HCCLM3细胞,用嘌呤霉素筛选稳定干扰 Cx26表达的靶细胞,通过 Real-time PCR和Western blot鉴定Cx26的mRNA和蛋白表达情况;用“parachute”荧光示踪法检测细胞缝隙连接(gap junc-tion,GJ)功能;用MTT法、流式细胞术、Transwell迁移实验分别检测干扰Cx26对HCCLM3细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。结果 LV-Cx26组的Cx26 mRNA和蛋白表达明显低于LV-NC组和野生组细胞(P<0.01),并且LV-Cx26组的GJ功能也较LV-NC组和野生组明显减弱(P<0.01)。干扰Cx26可明显抑制HCCLM3细胞增殖(P<0.01),促进HC-CLM3细胞凋亡(P <0.01),降低其体外迁移能力(P <0.01)。结论慢病毒靶向干扰Cx26表达可明显减弱其GJ功能,并抑制高转移性肝癌HCCLM3细胞增殖、迁移能力,促进凋亡,降低其恶性生物学特性。

作者:阳洁;覃贵慧;陈军泽

来源:中国药理学通报 2014 年 7期

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阳洁;覃贵慧;陈军泽
来源:
中国药理学通报 2014 年 7期
标签:
缝隙连接蛋白26 缝隙连接 肝癌 增殖 凋亡 迁移 慢病毒载体 connexin 26 gap junction hepatocellular carcinoma proliferation apoptosis migration lentiviral vector
目的:探讨缝隙连接蛋白26(connexin 26,Cx26)对人高转移性肝癌 HCCLM3细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。方法构建Cx26干扰慢病毒载体感染HCCLM3细胞,用嘌呤霉素筛选稳定干扰 Cx26表达的靶细胞,通过 Real-time PCR和Western blot鉴定Cx26的mRNA和蛋白表达情况;用“parachute”荧光示踪法检测细胞缝隙连接(gap junc-tion,GJ)功能;用MTT法、流式细胞术、Transwell迁移实验分别检测干扰Cx26对HCCLM3细胞增殖、凋亡、迁移能力的影响。结果 LV-Cx26组的Cx26 mRNA和蛋白表达明显低于LV-NC组和野生组细胞(P<0.01),并且LV-Cx26组的GJ功能也较LV-NC组和野生组明显减弱(P<0.01)。干扰Cx26可明显抑制HCCLM3细胞增殖(P<0.01),促进HC-CLM3细胞凋亡(P <0.01),降低其体外迁移能力(P <0.01)。结论慢病毒靶向干扰Cx26表达可明显减弱其GJ功能,并抑制高转移性肝癌HCCLM3细胞增殖、迁移能力,促进凋亡,降低其恶性生物学特性。