目的:研究大鼠腺苷 A1受体( A1 R )和腺苷 A2 A (A2AR)受体的siRNA分别转染大鼠肝星状细胞(HSC)对乙醛诱导的 HSC 活化增殖的影响。方法采用乙醛诱导HSC-T6建立离体的大鼠酒精性肝纤维化HSC模型,设计并合成A1R和A2AR小干扰RNA( small interfering RNA, siR-NA)序列,通过脂质体 LipofectamineTM 2000瞬时转染至HSC-T6细胞内,荧光倒置显微镜观察细胞的转染效率,用四甲基偶氮唑盐( MTT )法检测 HSC-T6细胞增殖变化;利用Real-Time qPCR及Western blot法分别检测HSC-T6的A1R、A2AR、α-SMA、Collagen I mRNA及蛋白表达。结果将A1R和A2AR siRNA转染至HSC-T6细胞内,A1R和A2AR基因及蛋白的表达水平明显降低;同时α-SMA、Collagen I mRNA及蛋白表达水平亦明显降低;靶向封闭A1R或A2AR基因的表达可明显抑制HSC-T6细胞的活化增殖。结论靶向封闭A1R或A2AR基因的表达可明显抑制HSC-T6细胞的活化增殖,A1R和A2AR可能是潜在的酒精性肝纤维化的治疗靶点。
作者:王琪;王和;饶玲;赵晗;杨凤;杨岩;吕雄文;李俊
来源:中国药理学通报 2015 年 1期