目的:探讨低氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)在喹啉酸诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤 PC12细胞损伤中的作用。方法用不同浓度的喹啉酸(2.5,5和10 mmol·L -1)处理 PC12细胞24 h 诱导细胞损伤,采用噻唑蓝还原法和乳酸脱氢酶漏出率检测法测定细胞损伤程度,采用丙二醛和超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞内氧自由基水平, Hoechst 33258单荧光染色法观察细胞凋亡,免疫荧光染色法检测 HIF-1α在细胞内的表达,免疫印迹法检测细胞 HIF-1α、蛋白激酶 B (Akt)、磷酸化 Akt (phosphorylated-Akt,p-Akt)、淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2,Bcl-2)和 Bcl-2相关 X 蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达。结果喹啉酸可剂量依赖性地诱导 PC12细胞损伤,导致细胞内氧自由基增多和细胞凋亡。同时,喹啉酸可使PC12细胞 HIF-1α表达上调并聚集于核内;p-Akt 表达增加, Bax/Bcl-2表达比例增加。结论HIF-1α和 Akt 介导了喹啉酸诱导 PC12的细胞凋亡;此外,氧化应激过程也可能参与了细胞损伤。
作者:李永金;杨开勇;张谊;陈月芳;端礼荣;黄晓佳
来源:中国药理学通报 2015 年 4期