目的：研究中脑星形胶质细胞来源的神经营养因子( mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor, MANF )对糖氧剥夺/再灌注( oxygen-glucose deprivation /reperfusion, OGD/R)诱导的人神经母细胞瘤细胞( SH-SY5Y)损伤的保护作用。方法体外培养SH-SY5Y细胞,对细胞进行糖氧剥夺(OGD)6 h,再灌注(R)12 h。在再灌注时期,根据是否给予重组人MANF蛋白处理(2μmol·L-1,12 h),将细胞分为正常对照组( NC)、NC+MANF组、OGD/R组和OGD/R+MANF组。随后光学显微镜下观察SH-SY5Y细胞形态的改变,MTT法检测细胞存活率, PI染色法检测细胞死亡率,免疫印迹法检测内源性MANF蛋白、内质网( ER)应激相关蛋白 GRP78/BiP、p-IRE1、p-eIF2α及促凋亡蛋白 cleaved caspase-3和 CHOP 的表达。结果光学显微镜下可见OGD/R组SH-SY5Y细胞胞体变小、变圆,突起缩短或消失。进一步研究发现, MANF 能明显改善 OGD/R 诱导的 SH-SY5Y细胞存活率下降和死亡率增加。免疫印迹法检测发现：OGD/R组细胞内源性MANF蛋白表达增高；ER应激相关蛋白GRP78/BiP、p-IRE1、p-eIF2α表达增高；促凋亡蛋白CHOP及cleaved caspase-3的表达明显高于NC组。给予重组人 MANF 蛋白可降低 OGD/R 组 GRP78/BiP、CHOP 及cleaved caspase-3的表达水平。结论 OGD/R

作者：孙瑞；刘珺；沈玉君；沙曼琪；徐胜春；沈玉先

来源：中国药理学通报 2015 年 6期