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目的:探讨生理和炎性微环境下人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)能否通过外泌体诱导调节性T细胞的生成来发挥免疫抑制功能。方法胶原酶消化法分离hUC-MSCs,应用流式细胞术鉴定hUC-MSCs。IFN-γ模拟体内炎性微环境,以未预处理为对照,分别提取外泌体,得到 Nor-hUC-exo 和IFN-γ-stimulated hUC-exo,分析其浓度及粒径分布等特征、并鉴定表面标记蛋白CD63的表达。采用hUC-MSCs、Nor-hUC-exo、IFN-γpretreated-hUC-MSCs、IFN-γstimulated hUC-exo与人外周血单个核细胞共培养5d后,流式细胞术检测T细胞的增殖、调节性T细胞的比例变化。结果 hUC-MSCs高表达CD73、CD44等间充质干细胞标志物。IFN-γ刺激前后外泌体粒径无明显变化,但IFN-γ刺激后分泌量和CD63增加(P<0.05)。CFSE染料示踪结果显示,hUC-MSCs来源的外泌体抑制PBMCs增殖(P<0.01),且IFN-γ刺激后明显提高外泌体的免疫抑制能力(P<0.01)。在活化T细胞中,IFN-γ-stimulated hUC-exo 组 Treg 比例(11.53±0.88%)与 IFN-γpretreated-hUC-MSCs组(7.54±0.50%)(P <0.05)、Nor-hUC-exo组(6.60±0.56%)(P <0.01)、对照组(3.87±0.73%)(P<0.01)相比升高。结论 hU

作者:杨翔宇;李晓红;肖静;胡洁媚;冯娟;霍然;何国东;吴岳恒;余细勇

来源:中国药理学通报 2017 年 33卷 1期

知识库介绍

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杨翔宇;李晓红;肖静;胡洁媚;冯娟;霍然;何国东;吴岳恒;余细勇
来源:
中国药理学通报 2017 年 33卷 1期
标签:
脐带 间充质干细胞 外泌体 炎性微环境 免疫调节 调节性T细胞 umbilical cord mesenchymal stem cells exosomes inflammatory microenvironment immunodu-lation regulatory T cells
目的:探讨生理和炎性微环境下人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mesenchymal stem cells,hUC-MSCs)能否通过外泌体诱导调节性T细胞的生成来发挥免疫抑制功能。方法胶原酶消化法分离hUC-MSCs,应用流式细胞术鉴定hUC-MSCs。IFN-γ模拟体内炎性微环境,以未预处理为对照,分别提取外泌体,得到 Nor-hUC-exo 和IFN-γ-stimulated hUC-exo,分析其浓度及粒径分布等特征、并鉴定表面标记蛋白CD63的表达。采用hUC-MSCs、Nor-hUC-exo、IFN-γpretreated-hUC-MSCs、IFN-γstimulated hUC-exo与人外周血单个核细胞共培养5d后,流式细胞术检测T细胞的增殖、调节性T细胞的比例变化。结果 hUC-MSCs高表达CD73、CD44等间充质干细胞标志物。IFN-γ刺激前后外泌体粒径无明显变化,但IFN-γ刺激后分泌量和CD63增加(P<0.05)。CFSE染料示踪结果显示,hUC-MSCs来源的外泌体抑制PBMCs增殖(P<0.01),且IFN-γ刺激后明显提高外泌体的免疫抑制能力(P<0.01)。在活化T细胞中,IFN-γ-stimulated hUC-exo 组 Treg 比例(11.53±0.88%)与 IFN-γpretreated-hUC-MSCs组(7.54±0.50%)(P <0.05)、Nor-hUC-exo组(6.60±0.56%)(P <0.01)、对照组(3.87±0.73%)(P<0.01)相比升高。结论 hU