目的 研究葛根素( puerarin, Pue)抗心肌缺血/再灌注损伤作用,及其可能涉及的线粒体机制.方法 建立H9c2心肌细胞缺氧/复氧( anoxia/reoxygenation, A/R)损伤模型.构建VDAC1 重组质粒pFLAG-VDAC1.细胞随机分为4组,正常对照组(Control)、缺氧/复氧组(A/R)、葛根素组(Pue+A/R)、VDAC1高表达组(pFLAG-VDAC1-葛根素),采用Real-time PCR法检测VDAC1 mRNA的表达情况,West-ern blot法检测其蛋白水平.流式细胞术观察线粒体膜电位(Δψm)和细胞凋亡,自动生化分析仪检测LDH、CK活性,线粒体肿胀实验检测各组细胞线粒体通透性转换孔道( mito-chondria permeability transition pore, mPTP)的开放情况.结果 与Control组相比,A/R组VDAC1 mRNA及蛋白表达水平均上调,LDH、CK水平升高,Δψm崩溃,mPTP开放,细胞凋亡明显增多.葛根素预处理则可下调VDAC1 表达,维持Δψm,防止mPTP开放,减少细胞凋亡.转染VDAC1高表达载体pFLAG-VDAC1,可取消葛根素的保护作用.结论 葛根素抗A/R损伤作用与 VDAC1 密切相关,其可通过下调VDAC1,防止 mPTP 开放,从而减少细胞凋亡,保护心肌细胞.
作者：马文；徐勇民；孟艳；贺敏；杨小梅；何明；廖章萍
来源：中国药理学通报 2018 年 34卷 7期
