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目的 探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)诱导的大鼠血清外泌体对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响.方法 大鼠进行MPC或对照处理(CON)后,提取血清中的外泌体,标记为MPC-Exo、CON-Exo.利用透射电镜和Western blot进行外泌体鉴定.H9c2心肌细胞随机分为Control组、H/R组、H/R+ CON-Exo组和H/R+ MPC-Exo组.除Control组细胞常规培养外,其余各组细胞均给予5h缺氧和lh复氧处理,H/R+ CON-Exo组和H/R+ MPC-Exo组细胞在H/R损伤前,分别与相应外泌体共孵育12 h.分别检测细胞活力、乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase,LDH)活性和细胞凋亡.结果外泌体提取物电镜下呈直径30~ 100 nm的圆形囊泡,并表达外泌体标志性蛋白.MPC-Exo与H9c2心肌细胞共孵育,可以明显减轻心肌细胞H/R损伤,增强细胞活力,减少LDH释放,并抑制心肌细胞凋亡;相反,CON-Exo与心肌细胞共孵育后,对H/R损伤无明显影响.结论 MPC诱导的大鼠血清外泌体可减轻H9c2心肌细胞H/R损伤,发挥心肌保护作用.

来源:中国药理学通报 2018 年 34卷 11期

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来源:
中国药理学通报 2018 年 34卷 11期
标签:
吗啡预处理 外泌体 心肌细胞 缺氧/复氧损伤 心肌保护 凋亡
目的 探讨吗啡预处理(morphine preconditioning,MPC)诱导的大鼠血清外泌体对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响.方法 大鼠进行MPC或对照处理(CON)后,提取血清中的外泌体,标记为MPC-Exo、CON-Exo.利用透射电镜和Western blot进行外泌体鉴定.H9c2心肌细胞随机分为Control组、H/R组、H/R+ CON-Exo组和H/R+ MPC-Exo组.除Control组细胞常规培养外,其余各组细胞均给予5h缺氧和lh复氧处理,H/R+ CON-Exo组和H/R+ MPC-Exo组细胞在H/R损伤前,分别与相应外泌体共孵育12 h.分别检测细胞活力、乳酸脱氢酶(lactic acid dehydrogenase,LDH)活性和细胞凋亡.结果外泌体提取物电镜下呈直径30~ 100 nm的圆形囊泡,并表达外泌体标志性蛋白.MPC-Exo与H9c2心肌细胞共孵育,可以明显减轻心肌细胞H/R损伤,增强细胞活力,减少LDH释放,并抑制心肌细胞凋亡;相反,CON-Exo与心肌细胞共孵育后,对H/R损伤无明显影响.结论 MPC诱导的大鼠血清外泌体可减轻H9c2心肌细胞H/R损伤,发挥心肌保护作用.