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目的 从凋亡角度,观察丹酚酸B对体内外肝纤维化细胞的影响及对凋亡蛋白cleaved caspase-9的影响.方法 采用二乙基亚硝胺诱导小鼠肝纤维化模型,共造模12周;体外采用(25、50、100 μmol·L-)丹酚酸B作用于经TGF-β1刺激的HSC-T6细胞.HE染色检测病理学改变,并确定纤维化病变区域;Hoechst 33258荧光染色法观察纤维化区域细胞凋亡情况;AnnexinV-FITC/PI检测凋亡率;Western blot法检测纤维化组织和HSC-T6细胞中cleaved caspase-9的表达.结果 HE染色结果提示12周为小鼠肝纤维化时期,丹酚酸B低、高剂量组未形成假小叶,纤维化程度均轻于模型组;Hoechst 33258染色显示,与模型组相比,丹酚酸B低、高剂量能够明显促进纤维化区域细胞凋亡;AnnexinV-FITC/PI结果显示,丹酚酸B促进TGF-β1刺激的HSC-T6凋亡;Western blot结果提示,与模型组比较,丹酚酸B组cleaved caspase-9表达水平明显升高;与TGF-β1组比较,丹酚酸B50μmol·L-1组cleaved caspase-9表达明显增加.结论 丹酚酸B能够明显促进体内外肝纤维化细胞凋亡,其促凋亡进机制可能与上调cleaved caspase-9有关.

作者:阚悦;杨雁

来源:中国药理学通报 2019 年 35卷 6期

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作者:
阚悦;杨雁
来源:
中国药理学通报 2019 年 35卷 6期
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丹酚酸B TGF-β1 HSC-T6 肝纤维化 细胞凋亡 cleaved caspase-9
目的 从凋亡角度,观察丹酚酸B对体内外肝纤维化细胞的影响及对凋亡蛋白cleaved caspase-9的影响.方法 采用二乙基亚硝胺诱导小鼠肝纤维化模型,共造模12周;体外采用(25、50、100 μmol·L-)丹酚酸B作用于经TGF-β1刺激的HSC-T6细胞.HE染色检测病理学改变,并确定纤维化病变区域;Hoechst 33258荧光染色法观察纤维化区域细胞凋亡情况;AnnexinV-FITC/PI检测凋亡率;Western blot法检测纤维化组织和HSC-T6细胞中cleaved caspase-9的表达.结果 HE染色结果提示12周为小鼠肝纤维化时期,丹酚酸B低、高剂量组未形成假小叶,纤维化程度均轻于模型组;Hoechst 33258染色显示,与模型组相比,丹酚酸B低、高剂量能够明显促进纤维化区域细胞凋亡;AnnexinV-FITC/PI结果显示,丹酚酸B促进TGF-β1刺激的HSC-T6凋亡;Western blot结果提示,与模型组比较,丹酚酸B组cleaved caspase-9表达水平明显升高;与TGF-β1组比较,丹酚酸B50μmol·L-1组cleaved caspase-9表达明显增加.结论 丹酚酸B能够明显促进体内外肝纤维化细胞凋亡,其促凋亡进机制可能与上调cleaved caspase-9有关.