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目的 观察膜相关E3泛素连接酶ZNRF2对OGD/R致PC12细胞损伤的保护作用,并从自噬初步探究其机制.方法 体外培养PC12细胞,将PC12细胞分为正常组、模型组,采用qRT-PCR、Western blot检测细胞中ZNRF2 mRNA和蛋白的表达.为了进一步探讨ZNRF2对OGD/R致PC12细胞损伤的作用,将细胞分为正常对照组、模型组、ZNRF2过表达慢病毒组、空载病毒组、ZNRF2小干扰RNA组、阴性对照组,采用MTT实验检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot检测各组细胞自噬相关蛋白(LC3、p62、Beclin-1)表达改变.结果 与正常组相比,模型组中细胞ZNRF2 mRNA和蛋白表达明显降低,细胞活力明显降低,细胞凋亡率明显升高,LC3II、Beclin-1蛋白水平升高,p62蛋白表达明显下降;与模型组相比,LV-ZNRF2组细胞活力增加,细胞凋亡率和自噬水平减少,siR-ZNRF2组细胞活力明显下降,细胞凋亡率和自噬水平明显上升.结论 ZNRF2对OGD/R致PC12细胞损伤有明显保护作用,其机制可能与抑制自噬相关.

作者:顾超;谭晓丹;向葡;罗映;杨俊卿;王红

来源:中国药理学通报 2021 年 37卷 6期

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作者:
顾超;谭晓丹;向葡;罗映;杨俊卿;王红
来源:
中国药理学通报 2021 年 37卷 6期
标签:
氧糖剥夺/复糖复氧 PC12细胞 ZNRF2 自噬 mTOR 凋亡
目的 观察膜相关E3泛素连接酶ZNRF2对OGD/R致PC12细胞损伤的保护作用,并从自噬初步探究其机制.方法 体外培养PC12细胞,将PC12细胞分为正常组、模型组,采用qRT-PCR、Western blot检测细胞中ZNRF2 mRNA和蛋白的表达.为了进一步探讨ZNRF2对OGD/R致PC12细胞损伤的作用,将细胞分为正常对照组、模型组、ZNRF2过表达慢病毒组、空载病毒组、ZNRF2小干扰RNA组、阴性对照组,采用MTT实验检测细胞活力、流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot检测各组细胞自噬相关蛋白(LC3、p62、Beclin-1)表达改变.结果 与正常组相比,模型组中细胞ZNRF2 mRNA和蛋白表达明显降低,细胞活力明显降低,细胞凋亡率明显升高,LC3II、Beclin-1蛋白水平升高,p62蛋白表达明显下降;与模型组相比,LV-ZNRF2组细胞活力增加,细胞凋亡率和自噬水平减少,siR-ZNRF2组细胞活力明显下降,细胞凋亡率和自噬水平明显上升.结论 ZNRF2对OGD/R致PC12细胞损伤有明显保护作用,其机制可能与抑制自噬相关.