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目的 研究钩藤碱(Rhy)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的抑制作用及其可能的作用机制.方法 应用胰酶消化法制备新生大鼠原代心肌细胞,培养3 d后,随机分为正常对照组、模型组(AngⅡ 0.1 μmol·L-1)、Rhy 1,3和10 μmol·L-1组.心肌细胞加入Rhy 0,1,3和10μmol·L-1,30 min后再加入AngⅡ 0.1 μmol·L-1作用48 h.采用Leica Qwin V3图像分析系统测量心肌细胞的表面积,BCA法测定总蛋白质含量,激光共聚焦显微镜检测心肌细胞[Ca2+];,比色法测定细胞培养上清液一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,实时荧光定量PCR检测心房利钠因子(ANF)、心肌细胞钙调神经磷酸酶(CaN)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的表达.结果 与正常对照组比较,AngⅡ 0.1μmol·L-1明显诱导心肌细胞肥大,心肌细胞表面积由每个细胞(167±28)μm2增加至(462±42)μm2(n=6,P<0.01),总蛋白质含量由平均每个细胞(211±10)Pg增加至(299±12)Pg(n=6,P<0.01),ANF mRNA表达亦增加,由48±4增加至227±9(n=6,P<0.01);心肌细胞[Ca2+];荧光强度由93±18增加至149±9(n=6,P<0.01),NOS活性和NO含量分别由(0.76±0.03)kU·L-1和(1.36±0.10)μmol·L-1降低至(0.45±0.09)kU·L-1和(0.73±0.04)μmol·L-1(n=6,P<0.01

作者:何娜;孙安盛;吴芹;黄燮南;石京山

来源:中国药理学与毒理学杂志 2010 年 24卷 4期

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作者:
何娜;孙安盛;吴芹;黄燮南;石京山
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2010 年 24卷 4期
标签:
钩藤碱 肌细胞,心脏 肥大 血管紧张素Ⅱ 一氧化氮 钙调神经磷酸酶 细胞外信号调节激酶
目的 研究钩藤碱(Rhy)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌细胞肥大的抑制作用及其可能的作用机制.方法 应用胰酶消化法制备新生大鼠原代心肌细胞,培养3 d后,随机分为正常对照组、模型组(AngⅡ 0.1 μmol·L-1)、Rhy 1,3和10 μmol·L-1组.心肌细胞加入Rhy 0,1,3和10μmol·L-1,30 min后再加入AngⅡ 0.1 μmol·L-1作用48 h.采用Leica Qwin V3图像分析系统测量心肌细胞的表面积,BCA法测定总蛋白质含量,激光共聚焦显微镜检测心肌细胞[Ca2+];,比色法测定细胞培养上清液一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)活性,实时荧光定量PCR检测心房利钠因子(ANF)、心肌细胞钙调神经磷酸酶(CaN)、细胞外信号调节激酶2(ERK2)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的表达.结果 与正常对照组比较,AngⅡ 0.1μmol·L-1明显诱导心肌细胞肥大,心肌细胞表面积由每个细胞(167±28)μm2增加至(462±42)μm2(n=6,P<0.01),总蛋白质含量由平均每个细胞(211±10)Pg增加至(299±12)Pg(n=6,P<0.01),ANF mRNA表达亦增加,由48±4增加至227±9(n=6,P<0.01);心肌细胞[Ca2+];荧光强度由93±18增加至149±9(n=6,P<0.01),NOS活性和NO含量分别由(0.76±0.03)kU·L-1和(1.36±0.10)μmol·L-1降低至(0.45±0.09)kU·L-1和(0.73±0.04)μmol·L-1(n=6,P<0.01