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目的 探讨游离脂肪酸(FFA)对人正常肝细胞L02的脂毒性及其机制.方法 用含FFA 0.2,0.4和0.8 mmol·L-1的培养液培养L02细胞48 h,通过油红O染色和甘油三酯(TG)含量检测胞内脂质蓄积,测定培养上清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性分析肝细胞损伤,锥虫蓝拒染计数法分析细胞存活率,测定琥珀酸脱氢酶(SDH)活性分析线粒体功能,DCFH-DA法检测活性氧类(ROS)水平,比色法检测总谷胱甘肽和丙二醛(MDA)含量,FITC-Annexin V/PI法检测细胞凋亡.结果 经FFA处理L02细胞48 h后,FFA 0.4和0.8 mmol·L-1组TG含量131±50和(267±71) μmol·g-1蛋白较正常对照组(32±6)μmol·g-1蛋白显著升高(P<0.05),FFA 0.2,0.4和0.8 mmol·L-1组GPT活性分别为2.05±0.06,2.78±0.64和(2.43±0.55)U·L-1,较正常对照组(1.10±0.05)U·L-1显著升高(P<0.05).锥虫蓝拒染法显示各FFA组细胞存活率无显著变化;FFA 0.4和0.8 mmol· L-1组SDH活性(A490nm)分别为2.10±0.11和1.95±0.11,均较正常对照组1.46±0.06显著升高(P<0.01);FFA 0.8 mmol· L-1组ROS水平为642±58,较正常对照组559±31显著升高(P<0.01).FFA 0.2,0.4和0.8 mmol·L-1组总谷胱甘肽水平分别为176 ±6,180±1 1和(96±4)μmol·g-1蛋白,较正常对照组(202±13)μmol·g-1蛋

作者:刘艳;施文荣;洪振丰

来源:中国药理学与毒理学杂志 2013 年 27卷 4期

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作者:
刘艳;施文荣;洪振丰
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2013 年 27卷 4期
标签:
脂肪酸类 毒性作用 氧化性应激 fatty acids toxic actions oxidative stress
目的 探讨游离脂肪酸(FFA)对人正常肝细胞L02的脂毒性及其机制.方法 用含FFA 0.2,0.4和0.8 mmol·L-1的培养液培养L02细胞48 h,通过油红O染色和甘油三酯(TG)含量检测胞内脂质蓄积,测定培养上清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)活性分析肝细胞损伤,锥虫蓝拒染计数法分析细胞存活率,测定琥珀酸脱氢酶(SDH)活性分析线粒体功能,DCFH-DA法检测活性氧类(ROS)水平,比色法检测总谷胱甘肽和丙二醛(MDA)含量,FITC-Annexin V/PI法检测细胞凋亡.结果 经FFA处理L02细胞48 h后,FFA 0.4和0.8 mmol·L-1组TG含量131±50和(267±71) μmol·g-1蛋白较正常对照组(32±6)μmol·g-1蛋白显著升高(P<0.05),FFA 0.2,0.4和0.8 mmol·L-1组GPT活性分别为2.05±0.06,2.78±0.64和(2.43±0.55)U·L-1,较正常对照组(1.10±0.05)U·L-1显著升高(P<0.05).锥虫蓝拒染法显示各FFA组细胞存活率无显著变化;FFA 0.4和0.8 mmol· L-1组SDH活性(A490nm)分别为2.10±0.11和1.95±0.11,均较正常对照组1.46±0.06显著升高(P<0.01);FFA 0.8 mmol· L-1组ROS水平为642±58,较正常对照组559±31显著升高(P<0.01).FFA 0.2,0.4和0.8 mmol·L-1组总谷胱甘肽水平分别为176 ±6,180±1 1和(96±4)μmol·g-1蛋白,较正常对照组(202±13)μmol·g-1蛋