目的:探讨粉防己碱与替莫唑胺联合用药对人脑胶质瘤细胞U87细胞存活、克隆形成、迁移能力及凋亡的影响。方法采用CCK-8法检测粉防己碱8~64μmol·L-1,或替莫唑胺50~400μmol·L-1,或替莫唑胺+粉防己碱3.2和6.4μmol·L-1作用24 h 后细胞存活率。粉防己碱6.4μmol·L-1、替莫唑胺100μmol·L-1或替莫唑胺+粉防己碱3.2和6.4μmol·L-1作用24 h后,Giemsa染色检测细胞的克隆形成;Transwell小室检测细胞迁移能力;流式细胞术AnnexinⅤ/PI 双染法检测细胞凋亡;Western蛋白质印迹法检测Bcl-XL、活化胱天蛋白酶3及活化聚ADP核糖聚合酶(PARP)蛋白表达。结果 CCK-8实验结果显示,单用粉防己碱和替莫唑胺均能抑制U87细胞的生长,且具有浓度依赖性(r=0.903,P<0.05),替莫唑胺100μmol·L-1+粉防己碱3.2和6.4μmol·L-1抑制率高于两药单用,经分析两者作用为相加。替莫唑胺可抑制U87细胞的克隆形成和迁移能力,两药联用时比单用替莫唑胺抑制作用更明显(P<0.05);与单用替莫唑胺相比,两药联用时抗凋亡蛋白Bcl-XL明显减少,执行凋亡的活化的剪切胱天蛋白酶3蛋白及剪切PARP明显增多。结论粉防己碱联用替莫唑胺能明显抑制人脑胶质瘤U87细胞的生长、克隆形成及迁移能力,并诱导激活胱天蛋
作者:张勇;马继伟;李海莹;王绍祥;闫雍容;刘子豪;杜彬;钟雪云
来源:中国药理学与毒理学杂志 2014 年 3期