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目的:探讨苦参碱在体外诱导人髓母细胞瘤 D341细胞增殖、凋亡和自噬的作用。方法体外培养细胞,随机分为对照组、苦参碱0.5,1.0,1.5和2.0 g??L-1组,作用时间为24,48和72 h。 CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞结构,Western蛋白质印迹法检测细胞 Bax、Bcl-2、胱天蛋白酶3及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Bcl-2同源结构域蛋白抗体beclin1蛋白表达。随后在苦参碱作用前1 h 加入终浓度为5 mmol??L-1的自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),观察细胞beclin1和 LC3蛋白表达的变化。结果苦参碱0.5~2.0 g??L-1能明显抑制 D341细胞增殖,具有浓度效应关系(r24 h =0.994,r48 h =0.992,r72 h =0.996,P<0.01),而且可诱导 D341细胞凋亡( r24 h =0.937,r48 h =0.947,r72 h =0.987,P<0.01);苦参碱浓度为2.0 g??L-1时,对 D341细胞增殖的抑制作用(r=0.999,P<0.01)和凋亡的诱导作用(r=0.990,P<0.01)具有时间效应关系。透射电镜观察发现,苦参碱2.0 g??L-1作用24 h, D341细胞出现气穴样的空泡结构,细胞染色质浓缩、边缘化;作用48 h,细胞核染色质浓缩明显,细胞胞浆中可见空泡;作用72 h,细胞核固缩明显,部分细胞可见核裂解,空泡明显增大。 Western蛋白质印迹法实验结果表明,苦参碱0.5~

作者:周开宇;吉海龙;毛天明;白志强

来源:中国药理学与毒理学杂志 2015 年 2期

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作者:
周开宇;吉海龙;毛天明;白志强
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2015 年 2期
标签:
苦参碱 细胞增殖 细胞凋亡 自噬 matrine cell proliferation apoptosis autophagy
目的:探讨苦参碱在体外诱导人髓母细胞瘤 D341细胞增殖、凋亡和自噬的作用。方法体外培养细胞,随机分为对照组、苦参碱0.5,1.0,1.5和2.0 g??L-1组,作用时间为24,48和72 h。 CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞结构,Western蛋白质印迹法检测细胞 Bax、Bcl-2、胱天蛋白酶3及自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)和Bcl-2同源结构域蛋白抗体beclin1蛋白表达。随后在苦参碱作用前1 h 加入终浓度为5 mmol??L-1的自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA),观察细胞beclin1和 LC3蛋白表达的变化。结果苦参碱0.5~2.0 g??L-1能明显抑制 D341细胞增殖,具有浓度效应关系(r24 h =0.994,r48 h =0.992,r72 h =0.996,P<0.01),而且可诱导 D341细胞凋亡( r24 h =0.937,r48 h =0.947,r72 h =0.987,P<0.01);苦参碱浓度为2.0 g??L-1时,对 D341细胞增殖的抑制作用(r=0.999,P<0.01)和凋亡的诱导作用(r=0.990,P<0.01)具有时间效应关系。透射电镜观察发现,苦参碱2.0 g??L-1作用24 h, D341细胞出现气穴样的空泡结构,细胞染色质浓缩、边缘化;作用48 h,细胞核染色质浓缩明显,细胞胞浆中可见空泡;作用72 h,细胞核固缩明显,部分细胞可见核裂解,空泡明显增大。 Western蛋白质印迹法实验结果表明,苦参碱0.5~