目的:探讨双酚 A(BPA)对胚胎干细胞(ESC)分化潜能的影响,为合理评价 BPA 的安全性提供实验基础。方法制备及培养的小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和小鼠 ESC,用 BPA 0.1,1,10,100和1000μmol??L-1持续培养8 d,CCK-8法检测 MEF 和 ESC 细胞存活率并计算 lC50;通过实时荧光定量 PCR检测 ESC 中α肌球蛋白重链 mRNA 表达并计算其半数最大分化抑制浓度(lD50)。悬滴悬浮法培养的拟胚体,用 BPA 0.001,0.01,0.1和1μmol??L-1持续培养10 d,实时荧光定量 PCR 检测拟胚体各胚层标志基因表达的变化。结果 BPA 对小鼠 ESC 的 lC50为5.22×10-4 mol??L-1,对 MEF 的 lC50为6.25×10-4 mol??L-1,对小鼠 ESC 体外心肌细胞定向分化的 lD50为7.0×10-7 mol??L-1。 BPA 0.001和0.01μmol??L-1可以上调拟胚体的中胚层标志基因胎肝激酶1和球蛋白转录因子1的表达。结论 BPA 属于强胚胎毒性化合物。低浓度 BPA 对小鼠 ESC 分化为中胚层细胞有促进分化的作用。
作者:罗凌凤;崔栋;龚春梅;吴德生;黄海燕;刘建军;张文昌;庄志雄;杨淋清
来源:中国药理学与毒理学杂志 2015 年 2期