目的 探讨桑黄多糖P1抑制人源性肝癌HepG2细胞增殖的作用机制.方法 桑黄多糖P16.25~200 mg· L-1与HepG2细胞作用48 h,MTT法检测细胞存活率.桑黄多糖P1 100和200 mg· L-1与HepG2细胞作用48 h,流式细胞术检测细胞周期和凋亡;荧光分光光度法测定细胞内Ca2+浓度;实时荧光定量PCR检测细胞内钙调蛋白(CaM)、钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)、表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)、K-ras和c-fos基因表达;Western蛋白质印迹法检测细胞内CaMKⅡ和Kras蛋白表达.结果 桑黄多糖P1对HepG2细胞存活的抑制率随药物浓度的增大而显著提高,100和200 mg·L-1时抑制率高达44.0%和61.3%.桑黄多糖P1 200 mg· L-1处理48h S期细胞百分含量明显升高,由对照组的(23.3±3.4)%升高至(37.8±2.2)%(P<0.01),而G2/M期细胞百分含量明显降低,由对照组的(15.3±1.2)%降至(3.4±1.9)%(P<0.01);细胞凋亡率无明显变化.与对照组相比,桑黄多糖P1 100和200 mg·L-1处理48 h后CaM,CaMKⅡ,EGF,EGFR,K-ras和c-fos mRNA水平显著下降(P<0.01);Western蛋白质印迹检测结果显示,桑黄多糖P1作用48 h后HepG2细胞内CaMK Ⅱ和K-ras蛋白水平与对照组相比显著下降(P<0.01).桑黄多糖P1 200 mg·L-1处理细胞后,细胞内Ca2+荧光强度显著升高,0~20 min
作者:钟石;李有贵;林天宝;吕志强;计东风
来源:中国药理学与毒理学杂志 2015 年 29卷 3期