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目的 探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)是否诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬.方法 SAHA0.05,0.25,1.25,6.25和31.25 μmol· L-1处理OC3细胞24 h后,倒置显微镜吉姆萨和-瑞氏染色观察细胞形态变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活;流式细胞术检测自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)的表达;AO/EB双染色观察红色酸性自噬囊泡的出现;电镜直接观察自噬囊泡的结构.结果 不同浓度SAHA处理后,OC3细胞形态呈不规则梭形或多角形,细胞空泡化增多,折光性差.MTT结果表明,不同浓度SAHA处理对OC3细胞的存活具有明显的抑制作用,并存在时间和浓度效应关系,浓度相关系数分别为r12h=0.898,r24h=0.976和r48h=0.952(P<0.05),SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25lμmol·L-1时,时间相关系数分别为0.999,0.654,0.999,0.869和0.922(P<0.05).SAHA与OC3细胞作用24 h后,AO/EB双染色可见红色酸性自噬囊泡出现;进一步电镜观察,可观察到自噬囊泡结构;流式细胞术检测结果表明,与正常对照组相比,SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25 μmol·L-1处理OC3细胞24 h后,LC3B阳性细胞比率显著升高,分别为(1 9.4±2.4)%,(28.5±3.4)%,(34.6±3.9)%,(38.6±3.2)%和(61.8±1.0)%(P<0.05).结论 SAHA可能通过诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬而杀伤肿瘤细胞.

作者:赵岳;刘朝晖;张思;刘元林;周向东;王洋;童英;张毅

来源:中国药理学与毒理学杂志 2015 年 29卷 4期

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赵岳;刘朝晖;张思;刘元林;周向东;王洋;童英;张毅
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2015 年 29卷 4期
标签:
辛二酰苯胺异羟肟酸 卵巢肿瘤 自噬 suberoylanilide hydroxamic acid ovarian neoplasms autophagy
目的 探讨辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)是否诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬.方法 SAHA0.05,0.25,1.25,6.25和31.25 μmol· L-1处理OC3细胞24 h后,倒置显微镜吉姆萨和-瑞氏染色观察细胞形态变化;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞存活;流式细胞术检测自噬微管相关蛋白轻链3B(LC3B)的表达;AO/EB双染色观察红色酸性自噬囊泡的出现;电镜直接观察自噬囊泡的结构.结果 不同浓度SAHA处理后,OC3细胞形态呈不规则梭形或多角形,细胞空泡化增多,折光性差.MTT结果表明,不同浓度SAHA处理对OC3细胞的存活具有明显的抑制作用,并存在时间和浓度效应关系,浓度相关系数分别为r12h=0.898,r24h=0.976和r48h=0.952(P<0.05),SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25lμmol·L-1时,时间相关系数分别为0.999,0.654,0.999,0.869和0.922(P<0.05).SAHA与OC3细胞作用24 h后,AO/EB双染色可见红色酸性自噬囊泡出现;进一步电镜观察,可观察到自噬囊泡结构;流式细胞术检测结果表明,与正常对照组相比,SAHA 0.05,0.25,1.25,6.25和31.25 μmol·L-1处理OC3细胞24 h后,LC3B阳性细胞比率显著升高,分别为(1 9.4±2.4)%,(28.5±3.4)%,(34.6±3.9)%,(38.6±3.2)%和(61.8±1.0)%(P<0.05).结论 SAHA可能通过诱导人卵巢癌细胞OC3发生自噬而杀伤肿瘤细胞.