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目的 研究丁氟螨酯对人经神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞的毒性作用及其机制.方法 加入丁氟螨酯0.03,0.06,0.125,0.25,0.5,1,2,2.6,4,6,8和16 mmol·L-1处理SH-SY5Y细胞48 h,MTT法测定细胞存活;DCFH-DA荧光探针标记法检测细胞内活性氧(ROS)水平;JC-1标记法检测细胞线粒体膜电位;Hoechst 33258染色观察细胞核形态;碘化丙啶(PI)染色和流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测磷酸化P38蛋白(p-P38)和磷酸化Jun激酶(p-JNK)表达水平.结果 与溶剂(DMSO)对照组相比,共孵育48 h后,丁氟螨酯≥0.06 mmol·L-1时可降低细胞存活率(P<0.05),且随浓度增高细胞存活率有降低趋势,IC50为2.6 mmol·L-1;丁氟螨酯1,2,4和6 mmol·L-1组细胞ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.01).Hoechst 33258染色结果显示,丁氟螨酯2,4和6 mmol·L-1组SH-SY5Y细胞出现颗粒状荧光,细胞核固缩和崩解;流式细胞仪检测结果显示,丁氟螨酯2,4和6 mmol·L-1组细胞凋亡率由DMSO对照组的(0.7±0.1)

作者:赵海洲;陈永星;李楠;杨旭;李赛男;刘文华

来源:中国药理学与毒理学杂志 2017 年 31卷 4期

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作者:
赵海洲;陈永星;李楠;杨旭;李赛男;刘文华
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2017 年 31卷 4期
标签:
丁氟螨酯 SH-SY5Y细胞 细胞凋亡 活性氧 应激反应 cyflumetofen SH-SY5Y cells apoptosis reactive oxygen species stress reaction
目的 研究丁氟螨酯对人经神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y细胞的毒性作用及其机制.方法 加入丁氟螨酯0.03,0.06,0.125,0.25,0.5,1,2,2.6,4,6,8和16 mmol·L-1处理SH-SY5Y细胞48 h,MTT法测定细胞存活;DCFH-DA荧光探针标记法检测细胞内活性氧(ROS)水平;JC-1标记法检测细胞线粒体膜电位;Hoechst 33258染色观察细胞核形态;碘化丙啶(PI)染色和流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测磷酸化P38蛋白(p-P38)和磷酸化Jun激酶(p-JNK)表达水平.结果 与溶剂(DMSO)对照组相比,共孵育48 h后,丁氟螨酯≥0.06 mmol·L-1时可降低细胞存活率(P<0.05),且随浓度增高细胞存活率有降低趋势,IC50为2.6 mmol·L-1;丁氟螨酯1,2,4和6 mmol·L-1组细胞ROS水平升高(P<0.01),线粒体膜电位下降(P<0.01).Hoechst 33258染色结果显示,丁氟螨酯2,4和6 mmol·L-1组SH-SY5Y细胞出现颗粒状荧光,细胞核固缩和崩解;流式细胞仪检测结果显示,丁氟螨酯2,4和6 mmol·L-1组细胞凋亡率由DMSO对照组的(0.7±0.1)