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目的 观察纳米氧化锌暴露对斑马鱼胚胎心脏发育及大鼠心肌细胞(H9c2)的毒性作用及可能机制.方法 对纳米氧化锌材料进行表征化处理.斑马鱼胚胎在受精后4 h(4 hpf)暴露纳米氧化锌颗粒0.5,2.5,5.0和10.0 mg·L-1 24~96 h,计算胚胎存活率,并于胚胎17 hpf时间点,收集并用实时定量PCR测定中胚层脊索同源(noto),T盒16(tbx16),过短同源a(ta)和tbx6 mRNA表达;观察斑马鱼72 hpf心率.将心肌细胞标记红色荧光蛋白Tg(cmlc2.nuc-dsRed)的斑马鱼交配取胚胎,染毒纳米氧化锌2.5和5.0 mg·L-1,计数72 hpf胚胎心肌细胞数目.大鼠心肌细胞(H9c2)与纳米氧化锌0,0.1,0.5,1,5.0和10.0 mg·L-1共培养24 h,Alamar Blue方法检测细胞活力,透射电子显微镜观察线粒体超微结构,化学发光法和Seahorse仪分别检测细胞ATP和耗氧率水平.结果 纳米氧化锌在双蒸水中的粒径分布为(331±3)nm.48 hpf的斑马鱼胚胎纳米氧化锌LC50为21.81 mg· L-1.暴露纳米氧化锌2.5 mg·L-1后,17 hpf斑马鱼胚胎的心脏发育关键基因noto,ta和tbx6表达降低(P<0.05).72 hpf斑马鱼暴露纳米氧化锌5.0 mg·L-1,心率为153 min-1,与正常对照组相比降低12.6%(P<0.01),心肌细胞数目减少15.5%(P<0.01).纳米氧化锌0.5 mg·L-1可引起大鼠心肌细胞(H9c2)细胞活力降低(P<0.05

作者:徐诚;张春兰;邵文涛;顾爱华

来源:中国药理学与毒理学杂志 2017 年 31卷 6期

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作者:
徐诚;张春兰;邵文涛;顾爱华
来源:
中国药理学与毒理学杂志 2017 年 31卷 6期
标签:
氧化锌 纳米颗粒 斑马鱼 心脏发育 毒性 zinc oxide nanoparticls zebrafish cardiac development toxicity
目的 观察纳米氧化锌暴露对斑马鱼胚胎心脏发育及大鼠心肌细胞(H9c2)的毒性作用及可能机制.方法 对纳米氧化锌材料进行表征化处理.斑马鱼胚胎在受精后4 h(4 hpf)暴露纳米氧化锌颗粒0.5,2.5,5.0和10.0 mg·L-1 24~96 h,计算胚胎存活率,并于胚胎17 hpf时间点,收集并用实时定量PCR测定中胚层脊索同源(noto),T盒16(tbx16),过短同源a(ta)和tbx6 mRNA表达;观察斑马鱼72 hpf心率.将心肌细胞标记红色荧光蛋白Tg(cmlc2.nuc-dsRed)的斑马鱼交配取胚胎,染毒纳米氧化锌2.5和5.0 mg·L-1,计数72 hpf胚胎心肌细胞数目.大鼠心肌细胞(H9c2)与纳米氧化锌0,0.1,0.5,1,5.0和10.0 mg·L-1共培养24 h,Alamar Blue方法检测细胞活力,透射电子显微镜观察线粒体超微结构,化学发光法和Seahorse仪分别检测细胞ATP和耗氧率水平.结果 纳米氧化锌在双蒸水中的粒径分布为(331±3)nm.48 hpf的斑马鱼胚胎纳米氧化锌LC50为21.81 mg· L-1.暴露纳米氧化锌2.5 mg·L-1后,17 hpf斑马鱼胚胎的心脏发育关键基因noto,ta和tbx6表达降低(P<0.05).72 hpf斑马鱼暴露纳米氧化锌5.0 mg·L-1,心率为153 min-1,与正常对照组相比降低12.6%(P<0.01),心肌细胞数目减少15.5%(P<0.01).纳米氧化锌0.5 mg·L-1可引起大鼠心肌细胞(H9c2)细胞活力降低(P<0.05