目的 BH3-only蛋白是Bcl-2家族的促凋亡成员,可与抗凋亡成员结合启动肿瘤细胞凋亡和自噬.BH3拟似药通过模拟BH3-only蛋白促进肿瘤细胞凋亡和自噬,是肿瘤治疗中最具前景的药物之一.因此我们的研究目的是寻找新的BH3拟似药并阐明其抗肿瘤作用机制,为发展新的BH3拟似药奠定基础.方法 通过基于药效团模型的虚拟筛选技术和分子对接筛选出潜在的BH3拟似化合物.用MTS实验检测筛选出来的化合物对多种肿瘤细胞的抑制率.采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测化合物对细胞凋亡的影响,免疫共沉淀(Co-IP)检测化合物对Bcl-2/Beclin-1复合物的影响.共聚焦显微镜检测化合物对肿瘤细胞自噬的影响,采用Western印迹法检测凋亡和自噬相关蛋白的表达.通过hoechst 33342染色、透射电镜、MDC染色检测AD23联合伏立诺他对肿瘤细胞蛋白与自噬的影响,动物实验检测AD23联合伏立诺他的抗肿瘤效果.结果 筛选出BH3拟似化合物AD23.分子对接和表面等离子共振实验结果表明,AD23可与Bcl-2,MCL-1和Bcl-XL蛋白结合,通过MTS实验发现AD23抑制小细胞肺癌细胞系作用最强.Annexin V/PI双染实验结果显示,AD23可以浓度依赖性的促进H82细胞凋亡.Western印迹实验结果显示,AD23可以剂量依赖性诱导胱天蛋白酶3活化,诱导C-PARP蛋白增多从而激活凋亡通路.mChe
作者：李玉倩；李学军
来源：中国药理学与毒理学杂志 2021 年 35卷 10期
