目的 研究白细胞介素17(IL-17)促进PC9细胞表达程序性死亡配体1(PD-L1)的分子调控机制.方法 用IL-1750 μg·L-1刺激PC9细胞0(细胞对照),1,2,3,6和12 h,用逆转录PCR(RT-PCR)和Western 印迹法分别检测PC9细胞肌细胞增强因子2C(MEF2C)和PD-L1 mRNA及蛋白表达.构建pIRES2-MEF2C及其对照质粒pIRES2-EGFP和MEF2C短发夹RNA(shMEF2C)及其对照质粒shCTR,分别转染PC9细胞48 h(shRNA质粒转染后加IL-17刺激3h),即分pIRES2-EGFP和pIRES2-MEF2C组或shCTR,shCTR+IL-17和shMEF2C-4+IL-17组,同上检测MEF2C和PD-L1 mRNA及蛋白表达.另构建PD-L1启动子全长(pGL3-PD-L1-FL)和不同截短的pGL3-PD-L1-1~pGL3-PD-L1-4质粒.先将pGL3-PD-L1-FL与pIRES2-MEF2C共转染PC9细胞48h或与shMEF2C-4共转染48h加IL-17刺激3h,用双荧光素酶报告基因实验测定PD-L1-FL启动子活性(分组同上).此外,将对照pGL3-basic和pGL3-PD-L1-FL及pGL3-PD-L1-1~pGL3-PD-L1-4截短启动子质粒分别转染PC9细胞48h再加IL-17刺激3h或与pIRES2-MEF2C共转染PC9细胞后再测PD-L1启动子活性.结果 与细胞对照组相比,IL-17刺激2 h,MEF2C和PD-L1 mRNA及蛋白表达上调(P<0.05),3 h达峰(P<0.01).与pIRES2-EGFP组相比,pIRES2-MEF2C组PD-L1 mRNA(P<0.05)和蛋白表达(P<0.01)及启动子
作者:吴宁霞;应帅;葛文;李雅;阮玉婷;王伟民;李玉;张婧;邱文;王迎伟;赵晨卉
来源:中国药理学与毒理学杂志 2023 年 37卷 5期