目的:探讨莱菔硫烷(SFN)对喉癌Hep-2细胞增殖及凋亡的影响,并分析其对微小RNA-34a(miR-34a)/沉默信息调节因子1(SIRT1)的调控作用.方法:体外培养喉癌Hep-2细胞,并将其分为5组:空白对照组(未进行任何处理)、si-NC组(加入阴性对照质粒)、RNAi组(加入si-miR-34a)、SFN组(加入SFN)、SFN+RNAi组(RNAi组基础上加入SFN).采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-34a与SIRT1 mRNA表达水平;细胞增殖/毒性实验(CCK-8)检测SFN对Hep-2细胞增殖能力的影响;Hoechst染色法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期;蛋白印迹(WB)法检测SIRT1、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase-3)蛋白表达.双荧光素酶报告实验验证miR-34a与SIRT1的靶标关系.结果:SFN浓度为20μmol·L-1时可明显抑制喉癌Hep-2细胞增殖(P<0.05);与空白对照组、si-NC组相比,RNAi组miR-34a表达水平、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达量均显著降低,而SFN组则显著升高(P<0.05);RNAi组SIRT1 mRNA和蛋白表达、Bcl-2蛋白表达水平均显著升高,而SFN组显著降低(P<0.05);双荧光素酶报告实验显示SIRT1是miR-34a的靶基因.不同组别细胞周期差异具统计学意义(P<0.05).结论:SFN可明显抑

作者：韩海平；要兆旭；杨雪；赵倩

来源：中国药师 2019 年 22卷 6期