目的 探讨胞浆过表达促凋亡因子Smac对胰腺癌细胞Panc-1化疗敏感性的影响.方法 应用RT-PCR获得SmaccDNA(不含线粒体定位序列),定向克隆入pEGFP-N1质粒载体中,经限制性酶切、PCR及测序鉴定.利用脂质体将pEGFP-N1/Smac重组体转染胰腺癌细胞株Panc-1,应用荧光显微镜检测Smac-EGFP绿色荧光融合蛋白表达;流式细胞仪测定顺铂、5-FU诱导的转染细胞凋亡率;四甲基偶氮唑蓝(MIF)法检测细胞生长抑制率.结果 荧光显微镜下可见转染pEGFP-N1/Smac的细胞胞浆自发绿色荧光;在顺铂、5-FU作用下,N1/Smac转染组细胞凋亡率分别为(36.8±5.5)
作者:杜冀晖;张厚德;苏卓娃;麦丽文;沈关心;龚非力
来源:中国医师杂志 2007 年 9卷 1期