目的 构建胸腺素α1(Tα1)基因的原核表达质粒,并诱导表达.方法 根据Tα1的DNA序列设计引物,采用PCR法扩增Tα1的cDNA,将其克隆入T-vector,形成中介重组体pT-Tα1,再将其亚克隆至原核表达载体pGEX-3X,构建重组质粒pGEX-3X-Tα1,用内切酶酶切鉴定及DNA测序分析;将pGEX-3X-Tα1转入大肠杆菌,用RT-PCR方法检测宿主菌中Tα1mRNA,经IPTG诱导,用SDS-PAGE检测有无相应大小的Tα1融合蛋白表达.结果 经DNA测序和SDS-PAGE法鉴定,成功构建了Tα1重组质粒基因工程菌,表达和纯化了具有Tα1融合蛋白.结论 构建的Tα1重组质粒基因工程菌,表达和纯化了具有Tα1融合蛋白,为今后的研究打下了基础.
作者：彭仕芳；傅蕾；谭德明；苏先狮
来源：中国医师杂志 2007 年 9卷 9期
